[發(fā)明專利]一對用于檢測芋螺毒素的抗體及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110318267.5
• 申請日: 2021-03-25
• 公開（公告）號: CN113063950B
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 車津晶;原梅;朱小雨;張小差;劉作鋒
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N21/78
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 薛紅凡

本發(fā)明屬于生物藥物分析領(lǐng)域，特別是涉及一對用于檢測芋螺毒素的抗體及其應(yīng)用。本發(fā)明提供的用于檢測芋螺毒素的抗體包括捕獲抗體4B2和檢測抗體2#。所述抗體具有靈敏度高和特異性好的優(yōu)勢，在具體試驗(yàn)中，利用本發(fā)明提供的抗體進(jìn)行檢測時，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不會干擾GeXIVA[1,2]的測定，同時，大鼠及比格犬血漿中GeXIVA[1,2]的最低定量限為1.25ng/mL，表明本發(fā)明引物對具有極高的靈敏度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物藥物分析領(lǐng)域，特別是涉及一對用于檢測芋螺毒素的抗體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

疼痛是一種與組織損傷或潛在組織損傷相關(guān)的不愉快的主觀感覺和情感體驗(yàn)，也是一種預(yù)防機(jī)體遭受進(jìn)一步損傷的預(yù)防機(jī)制。誘發(fā)慢性疼痛的因素有很多，目前臨床上治療慢性疼痛的藥物都會伴有一定的不良反應(yīng)，同對于疼痛的治療效果也是很難讓人滿意。α9a10型煙堿乙酰膽堿受體(α9a10 nAChRs)被認(rèn)為一個新型的重要的治療疼痛的靶點(diǎn)。

芋螺毒素αO-GeXIVA是利用cDNA克隆技術(shù)從我國南海海域的將軍芋螺中鑒定的一種新型芋螺毒素，由28個氨基酸組成，包含4個半胱氨酸，可通過半胱氨酸之間形成二硫鍵產(chǎn)生3種異構(gòu)體。其中，GeXIVA[1,2]是迄今為止活性最強(qiáng)的特異性阻斷α9α10nAChRs的芋螺毒素，其半阻斷劑量為4.6nM。在慢性壓迫性神經(jīng)痛(CCI)模型和選擇性神經(jīng)損傷(SNI)模型中，通過肌肉注射GeXIVA[1,2]，模型動物的機(jī)械痛感得到顯著緩解，鎮(zhèn)痛效果達(dá)6h，具有極為強(qiáng)大的鎮(zhèn)痛活性。而相比之下，目前上市的一些同類鎮(zhèn)痛藥物，需要通過脊髓注射中樞給藥才能發(fā)揮藥效。因此GeXIVA[1,2]十分具有藥用潛力，有望運(yùn)用于臨床成為第二代新型鎮(zhèn)痛藥。

相比于GeXIVA[1,2]已廣泛開展的藥效學(xué)(PD)研究，其在藥代動力學(xué)(PK)方面的研究目前仍未很好的進(jìn)行。藥物在進(jìn)入體內(nèi)后經(jīng)過吸收、分布、代謝最后排泄出體外，獲取PK特征有助于闡明藥物在體內(nèi)發(fā)揮藥效作用的機(jī)制，同時也是藥物研究必不可少的部分。PK數(shù)據(jù)可以與PD相結(jié)合構(gòu)建PK-PD模型，借助數(shù)學(xué)方法把濃度、時間、藥物效應(yīng)三者之間的關(guān)系，能夠更為全面的了解藥物的效應(yīng)隨劑量及時間的變化規(guī)律。構(gòu)建PK-PD模型一方面有助于闡明藥物作用機(jī)制，評價(jià)藥物相互作用，為臨床前研究提供了有效的研究方法；另一方面可模擬臨床試驗(yàn)，優(yōu)化給藥方案，指導(dǎo)個體治療，為新藥的臨床應(yīng)用提供了重要的理論基礎(chǔ)。基于PK-PD模型，使用不同種屬動物的PK-PD數(shù)據(jù)構(gòu)建生理藥代動力學(xué)(PBPK)模型，可將臨床前動物數(shù)據(jù)外推至人、指導(dǎo)臨床人首次用藥(FIH)、預(yù)測藥物-藥物相互作用(DDI)、指導(dǎo)特殊人群用藥等。這些基于PK數(shù)據(jù)的模型的建立以及運(yùn)用對新藥的開發(fā)均具有深遠(yuǎn)的意義。PK研究的基礎(chǔ)，是一套高靈敏度高特異性的生物分析檢測方法。目前GeXIVA[1,2]仍欠缺一高靈敏度高特異性的在多種生物基質(zhì)中分析定量方法，這也是現(xiàn)階階段制約GeXIVA[1,2]PK研究展開的的主要因素之一。對于GeXIVA[1,2]，目前未有可行的能夠借鑒的生物分析方法，亦無商品化的抗體。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一對用于檢測芋螺毒素的抗體及其應(yīng)用。本發(fā)明提供的用于檢測芋螺毒素的抗體，具有靈敏度高特異性好，能夠充分滿足檢測需求的優(yōu)勢。本發(fā)明不僅為芋螺毒素提供了靈敏的生物檢測方法，也為芋螺毒素后續(xù)的可能的臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析提供了可靠的技術(shù)支持。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一對用于檢測芋螺毒素的抗體，所述抗體包括捕獲抗體4B2和檢測抗體2#；所述捕獲抗體4B2的重鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，捕獲抗體4B2的輕鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

優(yōu)選的，所述檢測抗體2#包括生物素標(biāo)記的檢測抗體2#。

本發(fā)明還提供了上述抗體在檢測芋螺毒素中的應(yīng)用。

優(yōu)選的，所述芋螺毒素包括GeXIVA[1,2]。