[發(fā)明專利]一種脊髓穿刺活檢組織固定脫鈣液、制備方法及脫鈣方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110315586.0
• 申請(qǐng)日: 2021-03-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113092229A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尤麗麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 寧波同盛生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N1/36
• 分類號(hào): G01N1/36;G01N1/31
• 代理公司: 寧波宇禾專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33430
• 代理人: 趙雅婷

本發(fā)明公開(kāi)了一種脊髓穿刺活檢組織固定脫鈣液、制備方法及脫鈣方法，由以下重量份成分制成：甲醛30?35份、甲醇300?400份、乙二胺四乙酸飽和液400?500份、PBS緩沖液7?9份、促進(jìn)劑25?35份、氯化鈉1?3份、水100?150份。本發(fā)明脫鈣液對(duì)組織損傷小，組織完整性更好，同時(shí)大大減少脫鈣時(shí)間，可由傳統(tǒng)的72h脫鈣降至24h，極大的滿足了快速出病理診斷報(bào)告的要求，同時(shí)能夠做準(zhǔn)分子檢測(cè)，對(duì)后期的靶向治療可以準(zhǔn)確用藥，提高診斷效率，通過(guò)脫鈣處理后，組織標(biāo)本染色效果更佳，結(jié)構(gòu)更為清晰，切片中的軟組織和骨組結(jié)構(gòu)均完整顯示，細(xì)胞核染色清晰，核質(zhì)對(duì)比鮮明，在脊髓穿刺活檢組織制片中有較高的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于病理檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種脊髓穿刺活檢組織固定脫鈣液、制備方法及脫鈣方法。

背景技術(shù)

骨髓穿刺活檢是病理檢查重要的組成部分之一，其診斷報(bào)告是血液科等臨床科室疾病診療的重要依據(jù)。骨組織在骨髓穿刺活檢組織中非常的常見(jiàn)，由于骨組織質(zhì)地堅(jiān)硬，如不能有效去除其中的鈣質(zhì)，病理技術(shù)室很難制作出優(yōu)質(zhì)切片或直接無(wú)法制作切片，故組織標(biāo)本脫鈣處理，亦即是組織標(biāo)本的軟化處理即成為此類切片制作的關(guān)鍵。如何在較短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行標(biāo)本固定、脫鈣處理，同時(shí)制成的切片又能與常規(guī)處理的不含骨組織切片一樣，不影響切片的染色，還能保證組織抗原不丟失，免疫組化染色效果好，從而有助于病理醫(yī)師對(duì)病變組織的鏡下診斷，一直是本領(lǐng)域的重大難題。

目前在病理技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)，用于組織標(biāo)本脫鈣的脫鈣液主要有以下四種：1、硝酸脫鈣液：脫鈣快速，不具有組織固定作用。硝酸對(duì)組織中蛋白質(zhì)與核酸損傷過(guò)大，嚴(yán)重影響后續(xù)組織染色效果，并造成后續(xù)免疫組化檢測(cè)與分子病理檢測(cè)結(jié)果假陰性。硝酸為強(qiáng)酸，運(yùn)輸與存儲(chǔ)要求高，運(yùn)輸、存儲(chǔ)與使用時(shí)，對(duì)環(huán)境和操作人員的安全存在較大安全隱患。2、鹽酸脫鈣液：脫鈣較快速，不具有組織固定作用。鹽酸對(duì)組織中蛋白質(zhì)與核酸造成的損傷過(guò)大，影響后續(xù)組織染色效果，并影響后續(xù)免疫組化檢測(cè)與分子病理檢測(cè)結(jié)果的可靠性。鹽酸為強(qiáng)酸，運(yùn)輸與存儲(chǔ)要求高，運(yùn)輸、存儲(chǔ)與使用時(shí)，對(duì)環(huán)境和操作人員的安全存在較大安全隱患。3、硫酸脫鈣液：脫鈣快速，不具有組織固定作用。硫酸對(duì)組織中蛋白質(zhì)與核酸損傷過(guò)大，嚴(yán)重影響后續(xù)組織染色效果，并造成后續(xù)免疫組化檢測(cè)與分子病理檢測(cè)結(jié)果假陰性。硫酸為強(qiáng)酸，運(yùn)輸與存儲(chǔ)要求高，運(yùn)輸、存儲(chǔ)與使用時(shí)，對(duì)環(huán)境和操作人員的安全存在較大安全隱患。4、EDTA脫鈣液：EDTA脫鈣液的主要成分為EDTA二鈉，脫鈣時(shí)對(duì)組織損傷小，對(duì)后續(xù)染色與檢測(cè)影響小。但因?yàn)镋DTA為一種螯合劑通過(guò)螯和反應(yīng)進(jìn)行脫鈣，脫鈣時(shí)間需要3-4周，甚至更長(zhǎng)，難以被推廣使用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，提供一種脊髓穿刺活檢組織固定脫鈣液、制備方法及脫鈣方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

一種脊髓穿刺活檢組織固定脫鈣液，由以下重量份成分制成：甲醛30-35份、甲醇300-400份、乙二胺四乙酸飽和液400-500份、PBS緩沖液7-9份、促進(jìn)劑25-35份、氯化鈉1-3份、水100-150份。

優(yōu)選的，所述的脊髓穿刺活檢組織固定脫鈣液，由以下重量份成分制成：甲醛32份、甲醇350份、乙二胺四乙酸飽和液450份、PBS緩沖液8份、促進(jìn)劑30份、氯化鈉2份、水128份。

進(jìn)一步的，所述乙二胺四乙酸飽和液的配制方法如下：

(1)取乙二胺四乙酸與水按質(zhì)量比13：100混合攪拌10min；

(2)將上述混合液送入恒溫箱，于60℃下保持10h；

(3)取出于室溫下保存即可。

進(jìn)一步的，所述促進(jìn)劑由氯化鋁、氯仿、聚乙二醇辛基苯基醚按質(zhì)量比17：11：2混合配制得到。

一種如上所述的脊髓穿刺活檢組織固定脫鈣液的制備方法，包括以下步驟：

(1)按重量份分別稱取各配方原料成分，攪拌混勻；