[發明專利]高產乳酸的凝結芽孢桿菌、生物發酵飼料及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110313269.5
• 申請日: 2021-03-24
• 公開（公告）號: CN112961806B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 韓冰;劉向陽;肖進;真誠;賈紅敏;薛凌峰;譚薇;朱海源
• 申請（專利權）人: 中牧實業股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/56;A23K10/12;A23K10/30;A23K10/37;A23K20/20;A23K50/75;A23K50/80;C12R1/07
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 錢云

本發明提供高產乳酸的凝結芽孢桿菌、生物發酵飼料及其制備方法和應用，所述凝結芽孢桿菌保藏號為CGMCC No.21669。所述生物發酵飼料優選包括枯草芽孢桿菌、釀酒酵母和所述凝結芽孢桿菌的發酵產物。本發明提供的生物發酵飼料含有豐富的小肽和酸性物質以及膳食纖維等多種有效成分，可著重改善動物腸道健康，提高畜禽和水產動物適口性和生產性能，減少動物腹瀉，改善產品品質，殺死腸道致病菌，降低對環境的污染，具有安全無毒無殘留的優點，可以在一定程度上替代抗生素，且制備方法簡單易行。

技術領域

本發明涉及微生物及功能飼料技術領域，尤其涉及高產乳酸的凝結芽孢桿菌、生物發酵飼料及其制備方法和應用。

背景技術

凝結芽孢桿菌(Bacillus coagulans)，是一種革蘭氏陽性菌。產乳酸是凝結芽孢桿菌的一個重要特性。乳酸目前在飼料添加劑領域有著廣泛的應用。但目前已報道的文獻中提到的凝結芽孢桿菌產乳酸含量較低，例如G4菌株的產乳酸量僅為48.05mmol/L(4.32g/L)(陳秀秀等，一株凝結芽孢桿菌的分離鑒定及益生性分析[J]，2020，11：1-5)。

發酵飼料是以微生物、復合酶為生物飼料發酵劑菌種，將飼料原料轉化為微生物菌體蛋白、生物活性小肽類氨基酸、微生物活性益生菌、復合酶制劑為一體生物發酵飼料。生物發酵飼料不但可以彌補常規飼料中容易缺乏的氨基酸，而且能使其它粗飼料原料營養成份迅速轉化，達到增強消化吸收利用效果。

最常見的發酵飼料主要包括木薯渣、秸稈加工飼料、棉菜茶粽餅粕(如棕櫚粕、豆粕、棉粕、菜籽粕、油茶籽餅、蓖麻餅等)、動物下腳料、潲水發酵飼料、菌糠加工飼料、粉渣醋渣醬渣發酵飼料、果渣、酒糟、青貯飼料、生物蛋白與肽、米糠統糠等方面。市場上用于飼料發酵的益生菌種類主要是乳酸菌、芽孢桿菌、酵母和霉菌。但是，目前市面上的發酵豆粕等發酵產品，其營養成分有限，品質或味道欠佳，也不能滿足不同動物的營養需求。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供一株高產乳酸的凝結芽孢桿菌、一種生物發酵飼料及其制備方法和應用。

本發明采用以下技術方案：

第一方面，本發明提供一株高產乳酸的凝結芽孢桿菌(Bacillus coagulans)，該菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2021年1月19日，保藏編號為CGMCC No.21669。保藏地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所。

進一步地，本發明所述凝結芽孢桿菌的16SrDNA核苷酸序列為：SEQ ID NO.1。

第二方面，本發明提供一種微生物菌劑，包含上述的凝結芽孢桿菌。

本發明所述微生物菌劑除了包含上述凝結芽孢桿菌，還可以包含乳酸菌、酵母、其它芽孢桿菌等菌種中的一種或多種。

在本發明的具體實施方式中，所述微生物菌劑可由以下方法獲得：

將菌體與一定濃度的保護劑溶液混合制備成混懸液；然后將所述混懸液經過噴霧干燥工藝，進風溫度為120～140℃，出風溫度為60～70℃，制備成微生物菌劑。

其中保護劑選用乳清粉、脫脂奶粉、海藻糖、蔗糖、甘露寡糖等中的兩種或兩種以上，保護劑濃度為10～20％之間。

第三方面，本發明提供上述凝結芽孢桿菌或微生物菌劑在高產乳酸中的應用。所述乳酸主要指L-乳酸。

優選地，所述凝結芽孢桿菌的液體發酵培養基為：葡萄糖0.5～1％，酵母提取物0.5～2％，蛋白胨1～2％，硫酸錳0.001～0.01％，磷酸氫二鉀0.1～0.5％，硫酸鎂0.05～0.5％，pH5.5～7.0。

進一步地，將所述凝結芽孢桿菌接種至所述液體發酵培養基后，40～45℃，靜止培養24～48h。培養結束后，將發酵液在6000rad/min，離心20min，收獲菌體。