[發明專利]一種牛FRAS1基因插入/缺失突變的檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 202110302857.9
• 申請日: 2021-03-22
• 公開（公告）號: CN112795667B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發明（設計）人: 藍賢勇;李潔;宋恩亮;趙海諭;姜富貴;潘傳英;趙佳寧;費攀鋒;王勇勝;陳宏
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 范巍

1.牛FRAS1基因NC_037333.1:g.340433-340447位15-bp?CTAAACAAAAACAAC缺失突變位點在牛分子標記輔助選擇育種中的應用，其特征在于：所述牛FRAS1基因NC_037333.1:g.340433-340447位15-bp?CTAAACAAAAACAAC缺失突變位點與牛的繁殖性狀顯著相關，其中，具有缺失/缺失基因型DD的個體在繁殖性狀上較優；所述繁殖性狀選自卵巢長、黃體個數中的一種或兩種；所述牛為中國荷斯坦牛。

2.一種牛FRAS1基因插入/缺失多態性的檢測方法在牛分子標記輔助選擇育種中的應用，其特征在于：所述牛FRAS1基因插入/缺失多態性的檢測方法包括以下步驟：

以待測牛基因組DNA為模板，利用PCR擴增包含FRAS1基因外顯子區插入/缺失多態性位點的片段，將擴增產物進行電泳，根據電泳結果鑒定該插入/缺失多態性位點的基因型；所述插入/缺失多態性位點選自牛FRAS1基因NC_037333.1:g.340433-340447位15-bpCTAAACAAAAACAAC缺失突變位點；所述牛FRAS1基因NC_037333.1:g.340433-340447位15-bpCTAAACAAAAACAAC缺失突變位點與牛的繁殖性狀顯著相關，其中，具有缺失/缺失基因型DD的個體在繁殖性狀上較優；

所述繁殖性狀選自卵巢長、黃體個數中的一種或兩種；

所述牛為中國荷斯坦牛。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述PCR的擴增引物對為：

上游引物：5’-ACAGAATTCTCTCCAGAGCAATGAA-3’

下游引物：5’-CTGTCTTGGAAGAAACAGTGGC-3’。

4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述PCR采用的反應程序為：95℃預變性5min；94℃變性30s，68℃退火30s，72℃延伸20s，18個循環，每循環后退火溫度減1℃；94℃變性30s，50℃退火30s，72℃延伸20s，25個循環；72℃延伸10min；所述電泳采用質量濃度為2.5％的瓊脂糖凝膠。

5.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：根據電泳結果，所述插入/缺失多態性位點有三個基因型，其中插入/插入基因型II表現為252bp一條帶紋，插入/缺失基因型ID表現為252bp和237bp兩條帶紋，缺失/缺失基因型DD表現為237bp一條帶紋。