[發明專利]肝臟前體細胞、其制備方法以及在阿爾茨海默病治療中的用途

有效

• 申請號: 202110301588.4
• 申請日: 2021-03-22
• 公開（公告）號: CN113143969B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 許琪;王飛
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;A61K35/407;A61P25/28
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;韓文華

本發明涉及肝臟前體細胞、其制備方法以及在阿爾茨海默病治療中的用途。具體地，本發明涉及肝臟前體細胞在制備用于治療患有阿爾茨海默病的患者的藥物中的用途，優選地，所述肝臟前體細胞表達表面標志物CD133、EpCAM和CK19。

技術領域

本發明涉及阿爾茨海默病的治療領域。具體地，本發明涉及肝臟前體細胞的分離、培養方法，以及其在治療阿爾茨海默病中的用途。

背景技術

阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一種漸進性的神經系統退行性疾病，最早由德國巴伐利亞精神病學家和神經學家Alois Alzheimer于1907年首次描述提出。臨床上以記憶力減退、認知能力下降和精神行為異常等癡呆表現為特征，已成為老年癡呆的主要病因，且以其極高的病死率和致殘率嚴重影響著老年人的日常生活。目前，全世界有5000萬AD患者，且發病率呈現出逐年上升，預計2050年，全球患者將達到1.52億。老年人在65歲以后AD發病率每5年上升一倍。目前我國65歲以上老齡人口AD患病率為3-4％。隨著我國社會老齡化日益加劇，AD患者也越來越多。AD病理特征有大腦皮層及海馬區的β淀粉樣肽(β-amyloid peptide，Aβ)在胞外沉積并形成老人斑(senile plaque，SP)、腦神經細胞內tau蛋白異常聚集形成的神經原纖維纏結(neurofibrillary tangle，NFT)、神經元突觸功能異常及錐體神經細胞丟失等，其中Aβ沉積是其最直接的病理表現。現代科學認為阿爾茨海默病是基因和環境因素共同作用的結果，其中基因起著主要作用。有許多假說可以解釋AD的發病機理，包括淀粉樣蛋白級聯反應，tau蛋白過度磷酸化，神經遞質和氧化應激。但是，根本原因和最佳治療方案仍然難以捉摸。目前，臨床上有一些藥物(主要是堿酯酶抑制劑和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑)可以改善AD的癥狀，但這些藥物僅能在病情初期改善病人的一些癥狀，不能阻止病程進展，長期服用后有效時間縮短，且對部分病人有較大的副作用。

近些年來，越來越多的研究者不再把精神類等腦部的疾病僅僅看作是腦中的病變，而是從外周與腦部的相互作用出發來看待問題。已有的研究認為，除中樞自身清除Aβ外，腦部的Aβ還可能通過血腦屏障轉運、腦組織間液流出以及腦脊液吸收進入淋巴等途徑由中樞進入外周進行清除，這些過程即是Aβ的外周清除，在這一過程中肝臟是重要的參與者。有研究報道，通過增強肝臟對Aβ的代謝能力，腦內的Aβ水平可顯著降低，并改善AD小鼠的病理和認知功能。

肝對于身體的內穩態具有至關重要的作用，從消化道尤其小腸吸收的營養物質首先通過門靜脈進入肝臟，肝臟除了代謝的功能外同時行使解毒的功能，大量因素可以影響肝，如病毒、毒物、代謝物、免疫攻擊等，從而導致肝炎、纖維化、肝硬化、肝癌甚至最終死亡。對于終末期肝病，唯一有效的方法就是肝移植，但在世界范圍內存在一個器官短缺問題，還有免疫排斥問題。直接移植肝細胞也可以治療肝病，但肝細胞的長期應用效率不高，培養困難，所以干細胞的移植就成為了一種很有前途的手段。可用的干細胞有胚胎干細胞，間充質干細胞，誘導多能干細胞，骨髓干細胞等，而近些年對肝臟前體細胞(hepatic progenitorcells,HPCs)的研究為肝病治療提供了新的手段。

HPCs是肝臟中的成體干細胞，成體干細胞是存在于已經分化的組織器官中的未分化細胞，具有自我更新的能力，并在一定條件下可以分化為各種特異的細胞類型，最早對成體干細胞的研究起始于20世紀60年代對造血干細胞(hematopoietic stem cells，HSCs)的研究，成體干細胞應用研究是再生醫學的重要組成部分。早在1958年，Wilson和Leduc發現了肝臟中的雙潛能前體細胞可以分化為肝實質細胞或膽道上皮細胞。HPCs在健康肝臟中的含量是極少的，這一點與小腸上皮的前體細胞或毛囊的前體細胞處于持續分裂增殖有很大不同。但當肝臟受到持續慢性損傷時(如四氯化碳腹腔注射，膽管結扎，蛋氨酸及膽堿缺乏飲食等)，HPCs才會大量激活并增殖。HPCs可以分化為肝實質細胞或膽管上皮細胞，參與肝臟再生；可以修復受慢性毒性損傷的肝臟，體外擴增培養后回體注射，可使得修復效果更加顯著；HPCs或可用于體外構建肝臟類器官，徹底解決器官移植短缺的問題。

發明內容