[發明專利]一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的熒光劑與方法

有效

• 申請號: 202110301583.1
• 申請日: 2021-03-22
• 公開（公告）號: CN113248493B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發明（設計）人: 湯日元;黃卓斌;李豐;閔曼
• 申請（專利權）人: 廣州匯標檢測技術中心;華南農業大學
• 主分類號: C07D471/04
• 分類號: C07D471/04;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 雷月華

1.一種用于快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的熒光劑，其特征在于，其為吡啶并吡嗪酮離子型化合物，化學結構式如下：

式(I)中的陰離子X是I、Br或Cl。

2.一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、將0.2mL不同濃度氨基甲酸酯類農藥溶液分別與0.1mL乙酰膽堿酯酶溶液、0.5mL顯色劑溶液、0.17mL去離子水混合，分別得到0.97mL不同濃度氨基甲酸酯類農藥的混合溶液A，水浴15min；顯色劑是指權利要求1所述的吡啶并吡嗪酮離子型化合物；

步驟2、在每份不同濃度氨基甲酸酯類農藥的混合溶液A中分別加入0.03mL碘化硫代乙酰膽堿溶液得到含有不同濃度氨基甲酸酯類農藥、乙酰膽堿酯酶、顯色劑與碘化硫代乙酰膽堿的樣品B，水浴反應5min；

步驟3、在430nm激發波長下測定每份樣品B熒光光譜，將最大發射波長、最大發射光強分別與其對應氨基甲酸酯類農藥的濃度進行線性擬合，可構建氨基甲酸酯類農藥檢測的標準濃度曲線；

步驟4、通過365nm紫外波長照射觀察每份樣品B熒光顏色變化，判斷體系熒光變色時氨基甲酸酯類農藥水溶液濃度，記作熒光突變閾值；

步驟5、對過濾后待測樣品取樣0.2mL與0.1mL乙酰膽堿酯酶溶液、0.5mL顯色劑溶液、0.17mL去離子水混合，得到0.97mL混合溶液C，水浴15min；

步驟6、混合溶液C加入0.03mL碘化硫代乙酰膽堿溶液得到樣品D，水浴反應5min；

步驟7、用熒光光譜儀在430nm激發波長下測定每份樣品D熒光光譜，對照步驟3中氨基甲酸酯類農藥檢測的標準濃度曲線可得出農殘濃度；在365nm紫外燈下觀察樣品D熒光，若樣品熒光為綠色，則可判斷溶液D中氨基甲酸酯類農藥濃度超過閾值；若樣品熒光為藍色，則可判斷溶液D中氨基甲酸酯類農藥濃度低于閾值。

3.根據權利要求2所述的一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的方法，其特征在于，所述的氨基甲酸酯類農藥為甲萘威、抗蚜威、異丙威、速滅威、殘殺威、仲丁威、克百威、西維因、甜菜安、甜菜寧、丁硫克百威或丙硫克百威中的一種或二種以上。

4.根據權利要求2所述的一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的方法，其特征在于，步驟1中所述的氨基甲酸酯類農藥保存于去離子水中濃度為25ppm；

步驟1中所述的顯色劑溶液保存于一定濃度pH＝7的磷酸二氫鈉-磷酸一氫鈉緩沖溶液中，濃度為1μM～10mM；

步驟1中所述的乙酰膽堿酯酶溶液保存于一定濃度pH＝7的磷酸二氫鈉-磷酸一氫鈉緩沖溶液中，濃度為0.05U/mL～20U/mL；

pH＝7的磷酸二氫鈉-磷酸一氫鈉緩沖溶液濃度為0.1mM～1M。

5.根據權利要求2所述的一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的方法，其特征在于，樣品B中不同濃度的氨基甲酸酯類農藥濃度分別為0、0.0000128ppm、0.000064ppm、0.00032ppm、0.0016ppm、0.008ppm、0.04ppm、0.2ppm、1ppm、5ppm。

6.根據權利要求2所述的一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的方法，其特征在于，步驟2中所述的碘化硫代乙酰膽堿溶液存儲于去離子水中，濃度為300μM～300mM。

7.根據權利要求2所述的一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的方法，其特征在于，步驟5所述待測樣品為河水、湖水、自來水、或井水；

步驟5中所述的乙酰膽堿酯酶溶液的濃度為0.05U/mL～2U/mL；

步驟5中所述顯色劑溶液的濃度為1μM～10mM。

8.根據權利要求2所述的一種快速可視化檢測氨基甲酸酯類農殘的方法，其特征在于，步驟6中所述的碘化硫代乙酰膽堿溶液存儲于去離子水中，濃度為300μM～300mM。