[發明專利]一種復合菌種發酵制備乳源血管緊張素轉化酶抑制肽的方法

在審

• 申請號: 202110299620.X
• 申請日: 2021-03-22
• 公開（公告）號: CN115109821A
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 皇甫潔;吳培涵;裴疆森;欒春光;王德良
• 申請（專利權）人: 中國食品發酵工業研究院有限公司
• 主分類號: C12P39/00
• 分類號: C12P39/00;C12P21/00;C12N1/20;C12R1/01;C12R1/225
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種復合菌種發酵制備乳源血管緊張素轉化酶抑制肽的方法，屬于微生物技術領域與發酵領域。以乳基發酵液中分子量在1000 Da以下的乳清蛋白水解物比例和血管緊張素轉化酶抑制率為評價指標，對復合菌株一瑞士乳桿菌（Lactobacillus helveticus，CICC:20289）、復合菌株二乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici，CICC:20719）分別進行復篩，獲得具備優良乳清蛋白水解性能和產生血管緊張素轉化酶抑制肽能力較高的菌株，將復篩得到的以上兩種復合菌株分別富集培養后，以一定復配比例接種于脫脂乳粉培養基，通過復合發酵，提升乳基發酵產物中血管緊張素轉化酶抑制肽含量。本發明工藝設計合理，可操作性強，為進一步提升發酵乳品中的小分子功能肽含量，高效制備乳源性血管緊張素轉化酶抑制肽，提高乳制品營養價值提供參考，具有很好的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種復合菌種發酵制備乳源血管緊張素轉化酶抑制肽的方法，屬于微生物技術領域與發酵領域。

背景技術

血管緊張素轉化酶(Angiotensin Converting Enzyme，ACE)是一種含鋅二肽羧肽酶，主要存在于哺乳動物體細胞以及雄性生殖細胞內，通過腎素-血管緊張素系統（renin-angiotensin system，RAS）和激肽釋放酶-激肽系統（kallikrein-kinin system，KKS）發揮作用，從而導致血壓升高。ACE抑制肽可通過與ACE活性位點結合，競爭性地抑制ACE的活性，調節RAS和KKS達到降低血壓的目的。

現代研究表明，活性肽與蛋白質及單一氨基酸相比，具有更強的生物活性和營養價值。活性肽專屬性強、生物活性高、毒副作用小，易被消化吸收，具有多種功能，作為預防和治療疾病的醫藥產品進行研究有著巨大的開發潛力。而食源性的ACE抑制劑控制高血壓起效快、作用強、安全性高，目前己經在臨床治療高血壓和心血管疾病中發揮了重要的作用。

乳及乳制品是人類最完善的動物蛋白質。研究表明，乳及乳制品不僅給人類身體提供豐富的營養，而且還是許多生物活性肽的重要來源，其中最有研究開發和應用價值的是抗高血壓活性肽。經研究發現在酪蛋白的水解物中可分離到具有ACE抑制活性的小肽以來，乳及乳制品來源的抗高血壓活性肽的研究成為乳品研究的新熱點。現在已經從生產發酵乳制品所用的微生物發酵液中發現了許多抗高血壓活性肽，種類豐富，而且對身體無任何副作用。

本發明公開了一種利用復合菌種發酵制備乳源血管緊張素轉化酶抑制肽的方法，該方法工藝設計合理，可操作性強，可為進一步提升發酵乳品中的小分子功能肽含量，開發乳源性ACE抑制肽，提高乳制品營養價值提供參考，具有很好的應用前景。

發明內容

本發明提供一種復合菌種發酵制備乳源血管緊張素轉化酶抑制肽的方法，包括如下步驟：

步驟一：分別將復合菌株一瑞士乳桿菌（Lactobacillus helveticus，CICC:20289）、復合菌株二乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici, CICC:20719）的菌懸浮液（菌落個數約為106個/mL）按3% 的接種量接入50 ml 12%的脫脂乳粉培養基中，混勻，38℃培養12 h。以乳基發酵液中分子量在1000 Da以下的乳清蛋白水解物比例和血管緊張素轉化酶抑制率為評價指標，對在復合菌株一、復合菌株二分別進行復篩，獲得具備優良乳清蛋白水解性能和產生血管緊張素轉化酶抑制肽能力較高的復合菌株一和復合菌株二復篩菌株；

步驟二：將步驟一得到的復合菌株一和復合菌株二復篩菌株分別富集培養后，在脫脂乳粉培養基中以一定復配比例（3：1）接種，菌種總添加量為3%，發酵初始pH為8.0；發酵周期結束后，在復合菌種發酵液中對發酵產物進行蛋白水解物比例分析、血管緊張素轉化酶抑制率IC50分析、二肽特征肽段鑒定。

附圖說明

圖1：復合菌株發酵乳品中ACE抑制肽的質譜鑒定圖。