[發(fā)明專利]一種大米降壓肽及其酶解制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110297112.8
• 申請(qǐng)日: 2021-03-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112940079B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟航
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州明創(chuàng)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K7/08
• 分類號(hào): C07K7/08;C12P21/06;C12P21/02;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/36;A61K38/10;A61P9/12;A61P39/06
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種大米降壓肽，其特征在于，

所述的大米降壓肽的氨基酸序列為ACHHQENYGNPTV；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，包括以下步驟：

(1)預(yù)處理：篩選和清洗大米；

(2)碾碎處理：選擇步驟(1)預(yù)處理后的大米，轉(zhuǎn)移至碾碎機(jī)中進(jìn)行低溫碾碎，得到碎米粒；

(3)酶解處理：選擇步驟(2)得到的碎米粒，轉(zhuǎn)移至料液槽中進(jìn)行浸泡處理，邊攪拌邊加熱；

(4)離心和超濾處理：選擇步驟(3)酶解處理后的料液，進(jìn)行高速離心，離心后取上清液，然后將上清液進(jìn)行超濾，得到濾液；

(5)吸附處理：選擇步驟(4)得到的濾液，并選擇大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行降壓肽的吸附，然后將降壓肽用生理鹽水洗脫下來(lái)；

(6)真空冷凍干燥處理：選擇步驟(5)吸附處理后的降壓肽，轉(zhuǎn)移到真空冷凍干燥設(shè)備中，最后收集粉末狀降壓肽，并在超低溫冰箱-80℃下保藏，即可；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，步驟(1)中大米的篩選標(biāo)準(zhǔn)為表面無(wú)雜質(zhì)、無(wú)霉腐壞點(diǎn)、無(wú)機(jī)械損傷的大米；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，步驟(1)中大米的清洗步驟為用清水清洗干凈并在陰涼處晾干；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，步驟(2)中的碎米粒的粒徑范圍為0.1mm-0.5mm；

步驟(2)中低溫碾碎的溫度為4℃-6℃；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，

步驟(3)中攪拌的速度為400r/min；

步驟(3)中攪拌的溫度為37℃；

步驟(3)中攪拌的時(shí)間為40min；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，步驟(3)中料液槽內(nèi)的溶液為含堿性蛋白酶、胰蛋白酶及檸檬酸鈉的磷酸鹽緩沖液；其中磷酸鹽緩沖液為含磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、氯化鈉、氯化鉀的溶液，其中磷酸二氫鉀的質(zhì)量濃度為0.35g/L，其中磷酸氫二鈉的質(zhì)量濃度為1.30g/L，其中氯化鈉的質(zhì)量濃度為10.0g/L，其中氯化鉀的質(zhì)量濃度為0.1g/L；其中堿性蛋白酶的質(zhì)量濃度為10mg/L，其中胰蛋白酶的質(zhì)量濃度為15mg/L；其中檸檬酸鈉的質(zhì)量濃度為20mg/L；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，步驟(4)中高速離心的離心力為7000g，其中高速離心的時(shí)間為1h，其中高速離心的溫度為4℃；

步驟(4)中超濾的步驟如下：

選擇5kDa的超濾膜進(jìn)行第一次過(guò)濾，洗脫液為生理鹽水；

選擇3kDa的超濾膜進(jìn)行第二次過(guò)濾，洗脫液為生理鹽水；

選擇1kDa的超濾膜進(jìn)行第三次過(guò)濾，洗脫液為生理鹽水；

收集分子量小于1kDa的過(guò)濾液；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，步驟(5)中大孔吸附樹(shù)脂的骨架選自二乙烯苯與丙烯酰胺的混合物，其中二乙烯苯與丙烯酰胺的用量比為2：3；

步驟(5)中大孔吸附樹(shù)脂的上樣流速為0.5mL/min；

步驟(5)中大孔吸附樹(shù)脂的解吸劑為75％乙醇；

如上述所述的大米降壓肽的酶解制備方法，步驟(6)中真空冷凍干燥的最低溫度控制在-40℃。