[發明專利]水溶性熒光染料偶聯物的純化方法在審
| 申請號: | 202110295555.3 | 申請日: | 2021-03-19 |
| 公開(公告)號: | CN115109435A | 公開(公告)日: | 2022-09-27 |
| 發明(設計)人: | 尚風琴;張少橋;王一婷;李漢東;章文蔚 | 申請(專利權)人: | 湖北華大基因研究院 |
| 主分類號: | C09B67/54 | 分類號: | C09B67/54;B01D15/36;B01D15/32 |
| 代理公司: | 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖陽 |
| 地址: | 430000 湖北省武*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 水溶性 熒光 染料 偶聯物 純化 方法 | ||
1.一種水溶性熒光染料偶聯物的純化方法,其特征在于,包括:對待純化樣品依次進行陰離子交換層析純化和反相制備液相色譜純化,得到純化產品。
2.根據權利要求1所述的純化方法,其特征在于,所述陰離子交換層析純化所采用的陰離子交換樹脂為DEAE樹脂。
3.根據權利要求2所述的純化方法,其特征在于,所述DEAE樹脂的質量與所述待純化樣品的質量比例為(8~12):1。
4.根據權利要求1所述的純化方法,其特征在于,所述陰離子交換層析純化包括:
(1)將陰離子交換樹脂裝柱,并利用水進行沖洗;
(2)將待純化樣品上樣,利用2~5倍柱體積的水進行沖洗;
(3)利用第一TEAB水溶液和水對所述待純化樣品進行梯度洗脫。
5.根據權利要求4所述的純化方法,其特征在于,所述第一TEAB水溶液的濃度為0.5~1.5mol/L。
6.根據權利要求1所述的純化方法,其特征在于,所述反相制備液相色譜純化中,利用第二TEAB水溶液和乙腈對所述陰離子交換層析純化獲得的樣品進行梯度洗脫。
7.根據權利要求6所述的純化方法,其特征在于,所述第二TEAB水溶液的濃度為0.02~0.15mol/L。
8.根據權利要求1所述的純化方法,其特征在于,所述水溶性熒光染料偶聯物包括熒光染料和連接臂。
9.根據權利要求8所述的純化方法,其特征在于,所述熒光染料選自羅丹明、熒光素、香豆素、花青、芘、氟硼熒染料、Alexa系列染料、ATTO系列染料及其衍生物中的至少之一。
10.根據權利要求8所述的純化方法,其特征在于,所述連接臂具有以下結構中的至少之一:
其中,R為鹵素原子、C1-8烷基、C1-8烷氧基、氨基、氰基、硝基、羧基或疊氮基。
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