[發明專利]一種索馬魯肽的制備方法

在審

• 申請號: 202110293753.6
• 申請日: 2021-03-19
• 公開（公告）號: CN113045641A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 陳晨晨;吳壯生;周莉
• 申請（專利權）人: 合肥科生景肽生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/16;C07K1/14
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 歐陽高鳳

1.一種索馬魯肽的制備方法，其特征在于，包括步驟：

(1)固相合成獲得全保護的第一肽段，所述第一肽段的氨基酸序列為R-His(R1)-Aib-Glu(R2)-Gly-Thr(R3)-Phe-Thr(R3)-Ser(R3)-Asp(R2)-Val-Ser(R3)-Ser(R3)-Tyr(R3)-Leu-Glu(R2)-Gly-Gln(R1)-Ala-COOH；

(2)固相合成獲得全保護的第二肽段，所述第二肽段的氨基酸序列為NH₂-Ala-Lys[AEEA-AEEA-γ-Glu(R2)-Otc(R2)]-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R4)-Leu-Val-Arg(R5)-Gly-Arg(R5)-Gly-R6；

(3)將所述全保護的第一肽段與所述全保護的第二肽段混合，發生縮合反應，以便獲得全保護的索馬魯肽中間體；

(4)利用切割試劑切割所述全保護的索馬魯肽中間體，獲得切割液，以便獲取索馬魯肽粗品；

其中，R選自Boc、Fmoc、Alloc、Cbz中的任意一種；

R1選自Trt、Boc、Dmbz、TOS中的任意一種；

R2、R3各自獨立地選自OtBu、Bn、pNB、Mpe中的任意一種；

R4選自Boc、Alloc、Cbz中的任意一種；

R5選自Pbf、Pmc、Mts中的任意一種；

R6選自4-(hydroxymethyl)phenol、2-Cl-Trt-Cl中的任意一種。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，保護基R6預先構建于固相合成所述全保護的第二肽段時所用的樹脂中，所述樹脂為2-Cl-trityl resin或SASRIN resin。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在所述全保護的第一肽段與所述全保護的第二肽段混合之前，利用縮合試劑對所述第一肽段的C端活化，所述活化的時間為0.1-2h。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述縮合試劑選自DIC、EDCI、HATU、HCTU、PyAOP、PyBOP中的至少之一。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中進行縮合反應時，所述全保護的第一肽段與所述全保護的第二肽段等比例混合；

任選地，所述縮合反應的時間為2-12h。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述切割試劑為TIPS、EDT、苯酚、茴香硫醚、水中的至少之一和TFA的混合液。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述切割試劑中TFA的濃度為85％-97.5％v/v；

任選地，所述切割試劑切割所述全保護的索馬魯肽中間體的時間為2-3h。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)進一步包括將所述切割液進行濃縮、沉淀、過濾，以便獲取所述索馬魯肽粗品；

任選地，沉淀時所用的沉淀劑選自冰乙醚、冰甲基叔丁基醚中的至少之一。

9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述方法進一步包括利用高效液相色譜法對所述索馬魯肽粗品進行純化，以及轉鹽和脫鹽的步驟。