[發明專利]一株促進帶葉兜蘭種子萌發形成幼苗的膠膜菌及其培養方法和應用

有效

• 申請號: 202110293701.9
• 申請日: 2021-03-19
• 公開（公告）號: CN112760239B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 姚娜;曹曉璐
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林業研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/30;A01P21/00;A01G22/63;C12R1/645
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 瞿曉晶

本發明涉及一株促進帶葉兜蘭種子萌發形成幼苗的膠膜菌及其培養方法和應用，屬于蘭科植物育苗技術領域。本發明提供了一株促進帶葉兜蘭種子萌發形成幼苗的膠膜菌(Tulasnellasp.)Php86，所述膠膜菌Php86的保藏編號為CGMCCNo.21082。本發明所述膠膜菌Php86能夠顯著促進帶葉兜蘭種子發育成根系完整的健康幼苗，可實現帶葉兜蘭種子溫室育苗或野外回歸，授粉后130d的種子與Php86共生萌發生根形成幼苗后，幼苗形成率高達9.04％。

技術領域

本發明涉及蘭科植物育苗技術領域，具體涉及一株促進帶葉兜蘭種子萌發形成幼苗的膠膜菌及其培養方法和應用。

背景技術

蘭科(Orchidaceae)植物是被子植物中較為進化的類群之一，其種子微小、沒有胚乳，僅為構造簡單的種皮包裹著一個未發育成熟的胚，缺乏萌發所需的營養。目前所有的野生蘭科植物均被列入《野生動植物瀕危物種國際貿易公約》(CITES)。兜蘭屬(Paphiopedilum)是蘭科植物中最具特色的一個類群，具有較高的觀賞價值。由于自然生境的破壞和過度采集，兜蘭現已成為瀕危植物物種之一。

為實現野生兜蘭種群恢復與保育，已開展兜蘭種子無菌萌發研究，期望通過種子無菌萌發和組織培養實現兜蘭的規模化繁殖，但兜蘭組織培養尚處于起步研究階段，存在組培苗出瓶移栽成活率低、抗逆性差等問題，限制了種群野外回歸；因此模仿自然環境下種子萌發，通過種子與菌根真菌共生萌發獲得幼苗，成為獲得大量兜蘭幼苗用于野外回歸一個重要技術途徑。但由于兜蘭種子成熟周期較長，不同種之間適宜播種時期差異較大，兜蘭屬植物種子共生萌發技術體系尚未完善，所報道的共生萌發多為發育至原球莖階段，通過共生萌發快速穩定獲得大量生根幼苗的報道較少。

帶葉兜蘭為地生或石上附生，在我國主要分布在廣西北部至西部、貴州西南部、云南東南部，因其萼片和花瓣為玫瑰紫色至紫褐色，具有較高的生態價值和觀賞價值。現有兜蘭屬植物種子共生萌發效率較低，多數研究忽略種子成熟度對萌發效率的影響。

發明內容

本發明的目的在于提供一株促進帶葉兜蘭種子萌發形成幼苗的膠膜菌及其培養方法和應用。本發明所述膠膜菌Php86能夠顯著促進帶葉兜蘭種子發育成根系完整的健康幼苗，可實現帶葉兜蘭種子溫室育苗或野外回歸。

本發明提供了一株促進帶葉兜蘭種子萌發形成幼苗的膠膜菌(Tulasnella sp.)Php86，所述膠膜菌Php86的保藏編號為CGMCC No.21082。

本發明還提供了上述技術方案所述膠膜菌Php86的培養方法，包括以下步驟：將膠膜菌Php86接種在培養基中進行培養。

本發明還提供了上述技術方案所述膠膜菌Php86在促進帶葉兜蘭種子萌發形成幼苗中的應用。

本發明還提供了上述技術方案所述膠膜菌Php86在促進帶葉兜蘭種子生根中的應用。

本發明還提供了上述技術方案所述膠膜菌Php86在促進帶葉兜蘭種子溫室育苗或野外回歸中的應用。

本發明還提供了一種上述技術方案所述膠膜菌Php86與帶葉兜蘭共生萌發的方法，包括以下步驟：

將帶葉兜蘭的種子與膠膜菌Php86共同培養；所述帶葉兜蘭的種子為授粉后110d以上收獲的種子。

優選的是，所述帶葉兜蘭的種子為授粉后130d以上收獲的種子。

優選的是，所述共同培養包括：將帶葉兜蘭的種子播種在培養基中，接種膠膜菌Php86，進行共生萌發培養。

優選的是，所述培養基包括OMA平板培養基；所述OMA平板培養基包括3.0g/L的燕麥粉和7.0g/L的瓊脂。

優選的是，所述共同培養的條件包括：光照周期為光照16h，黑暗8h；光照強度為1500～2000lx；溫度為23～27℃。