[發明專利]新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體疫苗及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202110290489.0
• 申請日: 2021-03-18
• 公開（公告）號: CN113308493A
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: 陳凌;楊臣臣;關素華;汪乾
• 申請（專利權）人: 廣州恩寶生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N15/861
• 分類號: C12N15/861;C12N15/50;C12N15/66;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

1.一種新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體，其特征在于，所述Ad26腺病毒載體負載有新冠病毒Spikes優化序列；所述新冠病毒Spikes優化序列優選為如SEQ ID NO.1所示序列。

2.根據權利要求1所述的新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體，其特征在于，所述Ad26腺病毒載體為復制缺陷型Ad26腺病毒載體。

3.根據權利要求2所述的腺病毒載體疫苗，其特征在于：所述復制缺陷型Ad26腺病毒載體為缺失E1和E3區基因的復制缺陷型Ad26腺病毒載體。

4.根據權利要求1所述的新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體，其特征在于，外源基因啟動子選自人巨細胞病毒CMV啟動子、鼠巨細胞病毒CMV啟動子、EF1a或PGK1中的至少一種。

5.根據權利要求1-4任一項所述的新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體，其特征在于，所述Ad26腺病毒載體可以調控SEQ ID NO：1所示核酸序列的表達。

6.一種新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體的制備方法，包括如下步驟：

(1)擴增SEQ ID NO.1所示序列，重組構建穿梭質粒1；

(2)擴增穿梭質粒1基因組，重組構建穿梭質粒2；

(3)擴增穿梭質粒2基因組，重組構建穿梭質粒3；

(4)擴增穿梭質粒3基因組，得到目的片段CMV-SPd-BGH，將目的片段CMV-SPd-BGH與去除E1和E3基因的pAd26質粒共轉染至細胞中，即得新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體。

7.一種新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體疫苗，其特征在于，所述疫苗包括權利要求1-5任一項所述新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體或由權利要求6所述制備方法制備得到的載體。

8.根據權利要求7所述的新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體疫苗，其特征在于，所述新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體可在人源細胞或人體內表達蛋白。

9.根據權利要求7所述的新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體疫苗，其特征在于：所述的疫苗為DNA質粒或RNA表達質粒。

10.根據權利要求8所述的新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體疫苗，其特征在于，所述蛋白可在人體內：

誘導免疫應答；或

產生生物報告分子；或

用于檢測的追蹤分子；或

調節基因功能；或

作為治療性分子。

11.根據權利要求7-10任一項所述的新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體疫苗，其特征在于，所述新型冠狀病毒Ad26腺病毒載體疫苗中還包括藥學上可接受的免疫調節劑、載體、稀釋劑、賦形劑或至少一種對COVID-19有治療作用的藥物。