[發明專利]一種層層自組裝益生菌微膠囊及其制備方法

有效

• 申請號: 202110290344.0
• 申請日: 2021-03-18
• 公開（公告）號: CN113197314B
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發明（設計）人: 劉歡;王倩玉;袁聰;胡婕倫;聶少平;謝明勇
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: A23L33/135
• 分類號: A23L33/135;A23L29/00;A23P10/30;A23P10/35;B01J13/10;B01J13/14
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙) 11617
• 代理人: 劉瑩

1.一種層層自組裝益生菌微膠囊的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)向多孔淀粉中加入緩沖液，靜置，加入聚乙烯亞胺，恒溫振蕩反應，洗滌，干燥，得多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體；

(2)將上述多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體、固體油脂混合，加入乳化劑的溶液，40℃~50℃恒溫乳化，冷卻，得填充固體油脂的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體；

(3)向上述填充固體油脂的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體的溶液中，加入三乙胺、二甲亞砜，攪拌，加入乙酸酐，反應，然后透析，產物冷凍干燥，得乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體；

(4)向上述乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體中，加入乳化劑的溶液，40℃~50℃乳化，加入脂肪酶，40~50℃反應10~20min，離心，產物冷凍干燥，得去除固體油脂的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體；

(5)將最外層帶負電的多層益生菌濕膠囊置于上述去除固體油脂的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體的溶液中，攪拌，干燥，得層層自組裝益生菌微膠囊；

其中，所述最外層帶負電的多層益生菌濕膠囊的制備方法包括：

將帶正電的生物聚電解質溶液與菌懸液混合，攪拌，離心，洗滌，得一層生物聚電解質吸附的益生菌濕膠囊；然后，將一層生物聚電解質吸附的益生菌濕膠囊置于帶負電的生物聚電解質溶液中，攪拌，離心，洗滌，得二層生物聚電解質吸附后的益生菌濕膠囊；

重復上述步驟，得最外層帶負電的至少二層生物聚電解質吸附的益生菌濕膠囊。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，

步驟(1)中，所述淀粉包括玉米淀粉、木薯淀粉、大米淀粉、甘薯淀粉、馬鈴薯淀粉中至少一種；

步驟(1)中，多孔淀粉、聚乙烯亞胺的質量比為1~3：1；

步驟(1)中，恒溫振蕩為30~50℃震蕩8~16h；

步驟(1)中，緩沖液為磷酸鹽緩沖液。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，

步驟(2)中，多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體、固體油脂、乳化劑的質量比為1：1~4：0.32~0.6；

步驟(2)中，所述乳化劑包括聚乙烯醇、十二烷基三聚乙醇磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉中至少一種。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，

步驟(3)中，所述填充固體油脂的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體、三乙胺、二甲亞砜、乙酸酐的比例0.2~1.5g：2~10ml：10~50ml：1~5ml；

步驟(3)中，反應的時間為20~26h；

步驟(3)中，反應的溫度為20~35℃。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，

步驟(4)中，乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亞胺載體、乳化劑、脂肪酶的質量比為1.0 g：0.32~0.6g：0.1~1mg。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，

所述步驟(5)中，帶正電的生物聚電解質包括殼聚糖；帶負電的生物聚電解質包括果膠、海藻酸鈉、羥甲基纖維素鈉、植酸鈉、硫酸葡聚糖中至少一種。

7.根據權利要求1或6所述的制備方法，其特征在于，

步驟(5)中，所述菌懸液為經MRS液體培養基培養的益生菌溶液；所述菌懸液的濃度為1.0×10⁹～1.0×10¹⁰ CFU/ml。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，

還包括：步驟(6)，對步驟(5)所得益生菌微膠囊進行干燥，得干燥化的益生菌微膠囊。

9.權利要求1~8任一項所述的方法制備得到的層層自組裝益生菌微膠囊。