[發明專利]一種基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號的均相雙熒光分析方法及其應用

有效

• 申請號: 202110287774.7
• 申請日: 2021-03-17
• 公開（公告）號: CN113030051B
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發明（設計）人: 陳飄飄;孟妍明;應斌武;馬瑩
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C12Q1/34;C12Q1/10;C12R1/19
• 代理公司: 成都科海專利事務有限責任公司 51202
• 代理人: 劉寧

本發明提供了一種基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號的均相雙熒光分析方法及其應用，涉及生物醫學診斷分析方法技術領域，該均相雙熒光分析方法包括基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號，金屬離子有效改變QDs的熒光信號和NMM的熒光信號，并基于QDs的熒光信號和NMM的熒光信號定量單一目標物，目標物為β?Gal或者E.Coli。本發明可用于β?Gal和E.Coli的高靈敏、簡單、均相和低成本雙熒光分析中，即定量β?Gal和E.Coli，為β?Gal和E.Coli的分析檢測提供更多選擇。

技術領域

本發明涉及生物醫學診斷分析方法技術領域，尤其是涉及一種基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號的均相雙熒光分析方法及其應用。

背景技術

現有生物化學和醫學診斷體系中，主要是依靠單個信號分子的信號強度實現對單一目標物的定量分析。如基于免疫識別反應的酶聯免疫吸附分析(ELISA)使用紫外可見分光光度計監測紫外信號、電化學發光分析方法監測三吡啶釕等的電化學信號、熒光分析方法監測熒光染料的熒光信號(如FITC、FAM等)等。

再比如，β-Gal和E.Coli的檢測方法上，其β-Gal分析檢測方法已有多種報道，然而使用雙熒光信號的分析方法極少，對于E.Coli的檢測現有臨床是利用培養和計數的方法實現細菌的定量，其耗時、靈敏度低、成本高。

目前的β-Gal和E.Coli的檢測方法具有以下不足：1.多數為單個信號讀取，其準確性易受介質等影響；2.一般無信號放大技術參與的分析方法，分析靈敏度低，信號放大引入時提高了分析靈敏度，同時大大增加成本；3.耗時，操作繁瑣，非均相分析方法。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的之一在于提供一種基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號的均相雙熒光分析方法，以解決現有技術中依靠單個信號分子實現β-Gal和E.Coli的檢測，準確性易受介質等影響，導致分析靈敏度低的技術問題。

本發明的目的之二在于提供一種基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號的均相雙熒光分析方法的應用。

為了實現上述目的之一，本發明提供了一種基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號的均相雙熒光分析方法，所述方法包括基于金屬離子選擇性調控QDs和NMM熒光信號，所述金屬離子有效改變QDs的熒光信號和NMM的熒光信號，并基于QDs的熒光信號和NMM的熒光信號定量單一目標物，所述目標物為β-Gal或者E.Coli。

所述NMM為N-甲基卟啉二丙酸。

根據一種優選實施方式，變價或者易于水解的所述金屬離子可有效抑制NMM的熒光信號。

根據一種優選實施方式，相同元素的不同價態所述金屬離子對NMM的熒光信號抑制作用具有顯著差異。

根據一種優選實施方式，所述金屬離子為Cu²⁺和Cu⁺，所述QDs和所述NMM選擇性識別Cu²⁺和Cu⁺，所述Cu⁺對所述QDs熒光信號和所述NMM熒光信號的抑制作用大于所述Cu²⁺。

根據一種優選實施方式，所述金屬離子為Fe³⁺和Fe²⁺，所述QDs和所述NMM選擇性識別Fe³⁺和Fe²⁺，所述Fe³⁺對所述QDs熒光信號和所述NMM熒光信號的抑制作用大于所述Fe²⁺。

根據一種優選實施方式，所述NMM和所述QDs的激發波長為399nm，所述NMM和所述QDs的熒光信號監測范圍均為400-700nm。

根據一種優選實施方式，所述QDs包括CdTe?QDs或者CdSe?QDs。