[發明專利]一種魚皮膠原蛋白的提取方法及應用

在審

• 申請號: 202110285862.3
• 申請日: 2021-03-17
• 公開（公告）號: CN112760351A
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發明（設計）人: 劉茹;吳丹;胡楊;熊善柏
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/14;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 藍曉玉

1.一種魚皮膠原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1魚皮預處理：除去魚肉和色素；

S2脫脂、除雜蛋白：按照料液比1：20的比例，使用NaOH溶液攪拌處理，周期性更換NaOH溶液；之后用蒸餾水洗至中性，按照料液比1：20的比例，使用異丙醇攪拌處理，用蒸餾水洗至中性，瀝干；

S3超聲處理：將脫脂、除雜蛋白后的魚皮置于料液為比1：20的醋酸溶液中進行超聲破碎處理，超聲條件為150-550W，時間為10-30min；

S4酶法提取：取前處理后的魚皮烘干，按魚皮干重的2％稱取胃蛋白酶，溶于0.5M，pH為2的醋酸溶液中，醋酸體積按料液比1:20計；

S5離心取上清；

S6鹽析：調上清液的pH至中性，加入硫酸銨，靜置；

S7離心取沉淀；

S8沉淀溶解：將沉淀溶于醋酸溶液中；重復S6-S8的操作；

S9鹽溶液透析：用截留分子量為10000D，預處理過的透析袋透析，先用0.04M的磷酸氫二鈉透析2天，再用0.02M的磷酸氫二鈉透析1天，最后用蒸餾水透析2天；

S10冷凍干燥：將透析后的溶液分裝于干燥容器中，冷凍干燥36-50小時，制備出成品為白色海綿狀固體。

2.根據權利要求1所述的一種魚皮膠原蛋白的提取方法，其特征在于：步驟S2中NaOH溶液濃度為0.01M，NaOH溶液處理溫度為4℃，處理時間為24h，每8h換一次NaOH；異丙醇溶液濃度為10％，處理條件為4℃攪拌8h。

3.根據權利要求1所述的一種魚皮膠原蛋白的提取方法，其特征在于：步驟S3中醋酸溶液濃度為0.5M。

4.根據權利要求1所述的一種魚皮膠原蛋白的提取方法，其特征在于：步驟S3中超聲條件為350W，時間為30min。

5.根據權利要求1所述的一種魚皮膠原蛋白的提取方法，其特征在于：步驟S5中4℃條件下攪拌處理4h后，10000rpm冷凍離心10min。

6.根據權利要求1所述的一種魚皮膠原蛋白的提取方法，其特征在于：步驟S7中在10000r/min，4℃，冷凍離心15min，取沉淀。

7.根據權利要求1所述的一種魚皮膠原蛋白的提取方法，其特征在于：步驟S10中冷凍干燥36-50小時。

8.如權利要求1-7任一所述的一種魚皮膠原蛋白的提取方法在魚皮膠原蛋白提取中的應用。