[發(fā)明專利]一種生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110284891.8 | 申請(qǐng)日： | 2021-03-17 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN112852893A | 公開（公告）日： | 2021-05-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王邵冰;修德恒;郭啟健 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 青島智庫(kù)生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12P7/64 | 分類號(hào)： | C12P7/64;C12N1/16;C12R1/74;C12R1/72 |
| 代理公司： | 北京高文律師事務(wù)所 11359 | 代理人： | 徐江華;李寶玉 |
| 地址： | 266100 山東*** | 國(guó)省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說(shuō)明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物 發(fā)酵 生產(chǎn) 二元酸 方法 | ||
1.一種生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其采用熱帶假絲酵母或維斯假絲酵母作為發(fā)酵微生物，包括下述步驟：
1)采用兩級(jí)種子罐對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)，其中一級(jí)種子罐培養(yǎng)后菌體生長(zhǎng)密度(OD620)大于0.5；
2)二級(jí)種子罐培養(yǎng)結(jié)束后將菌液接入到發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵期間pH控制在6.8-7.1范圍內(nèi)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中所述一級(jí)種子罐經(jīng)歷如下過(guò)程：堿水煮罐：pH≈12，120℃，4h；空消：130℃，1h；實(shí)消：消前適當(dāng)調(diào)節(jié)pH，使種前pH在6.7～7.0范圍內(nèi)；溫度121-123℃，保溫30分鐘，實(shí)消后體積1.4-1.6m3；實(shí)消結(jié)束，迅速降溫，待溫度降至30℃±0.5℃時(shí)接種、培養(yǎng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中一級(jí)培養(yǎng)工序如下控制：(1)前期正常培養(yǎng)，當(dāng)溶氧接近40％時(shí)，提高風(fēng)量，確保溶氧保持在40％-50％，風(fēng)量逐步提高；(2)當(dāng)菌體生長(zhǎng)密度(OD620)大于0.5，菌液溶氧、pH反彈，一級(jí)培養(yǎng)結(jié)束。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中所述二級(jí)種子罐經(jīng)歷如下過(guò)程：堿水煮罐：pH≈12，120℃，4h；空消：130℃，1h；實(shí)消前定容17.5t，實(shí)消：消前適當(dāng)調(diào)節(jié)pH，使種前pH在6.7～7.0范圍內(nèi)；溫度121-123℃，保溫30分鐘；實(shí)消結(jié)束，迅速降溫，待溫度降至30℃±0.5℃時(shí)接種、培養(yǎng)；其中，碳源為葡萄糖時(shí)則單消定容1.5t，二級(jí)種子罐定容16t，溫度113-115℃，保溫30分鐘，接種前壓入二級(jí)種子罐。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中二級(jí)培養(yǎng)工序如下控制：(1)前期正常培養(yǎng)，當(dāng)溶氧接近40％時(shí)，提高風(fēng)量，確保溶氧保持在40％-50％，風(fēng)量逐步提高；(2)菌液溶氧、pH反彈，二級(jí)培養(yǎng)結(jié)束。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中底料水和碳源連消，氮源實(shí)消，消后壓入發(fā)酵罐。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中發(fā)酵過(guò)程中采用流加方式補(bǔ)加二次碳源，補(bǔ)加烷烴原料前結(jié)束；補(bǔ)加二次碳源結(jié)束后，調(diào)節(jié)pH至6.9，補(bǔ)加烷烴原料：前三次間隔6h，每次補(bǔ)加烷烴原料3.5t，之后根據(jù)殘烴，低于4％補(bǔ)加烷烴原料3t，補(bǔ)加至發(fā)酵過(guò)程控制溶氧在40％-50％。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中所述二次碳源為葡萄糖或蔗糖。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其中發(fā)酵后期根據(jù)菌體活力考慮烷烴添加量，發(fā)酵結(jié)束時(shí)控制pH降至6.5。
10.由前述權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)所述的方法生產(chǎn)的長(zhǎng)鏈二元酸。
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