[發明專利]糖肽富集材料及其制備方法和富集方法在審
| 申請號： | 202110284482.8 | 申請日： | 2021-03-17 |
| 公開（公告）號： | CN113058577A | 公開（公告）日： | 2021-07-02 |
| 發明（設計）人： | 楊霜;劉兆亮 | 申請（專利權）人： | 蘇州大學 |
| 主分類號： | B01J20/28 | 分類號： | B01J20/28;B01J20/283;B01J20/285;G01N30/08;C12P21/06;C07K1/14 |
| 代理公司： | 蘇州謹和知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32295 | 代理人： | 許冬瑩 |
| 地址： | 215104 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 糖肽 富集 材料 及其 制備 方法 | ||
1.一種糖肽富集材料的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：
S1、提供基質微球顆粒、以及氨基羰基化合物或多肽，將所述基質微球顆粒與所述氨基羰基化合物或多肽共價結合，在所述基質微球顆粒表面共價結合高密度親水性的酰胺基、叔胺基或羥基中的一個或多個；
S2、洗脫純化得到糖肽富集材料。
2.如權利要求1所述的糖肽富集材料的制備方法，其特征在于，所述氨基羰基化合物包括[4-(氨基羰基)哌啶-1-基]乙酸水合物或[4-(氨基羰基)哌啶-1-基]乙醛；所述多肽為帶有正電荷酰胺基的氨基酸。
3.如權利要求1所述的糖肽富集材料的制備方法，其特征在于，所述基質微球顆粒表面具有氨基或羥基。
4.如權利要求1所述的糖肽富集材料的制備方法，其特征在于，所述基質微球顆粒為硅膠顆粒或聚合物顆粒。
5.如權利要求1所述的糖肽富集材料的制備方法，其特征在于，所述硅膠顆粒為多孔硅膠微粒，所述多孔硅膠微粒的粒徑為40-120um，所述多孔硅膠微粒的為微孔尺寸為80-300埃。
6.一種使用如權利要求1-5任一項所述的糖肽富集材料的制備方法得到的糖肽富集材料，其特征在于，所述糖肽富集材料包括基質微球顆粒、以及與所述基質微球顆粒表面共價結合的親水性的酰胺基、叔胺基或羥基中的一個或多個。
7.一種基于如權利要求6所述的糖肽富集材料的富集方法，其特征在于，所述糖肽富集材料通過親水的方式用于糖肽的富集，所述富集方法包括：
(1)使用糖肽富集材料制備親水萃取柱；
(2)預處理所述親水萃取柱；
(3)使用蛋白酶水解糖蛋白得到多肽和糖肽的樣本液，將所述樣本液加入到所述親水萃取柱中并將過濾液多次重新加到所述親水萃取柱中；
(4)清洗所述親水萃取柱；
(5)洗脫所述糖肽，收集洗脫液，干燥得到富集的糖肽。
8.如權利要求7所述的基于糖肽富集材料的富集方法，其特征在于，制備親水萃取柱的具體方法為：
(11)提供SPE萃取管，將孔徑小于20um的第一篩板放入所述SPE萃取管內；
(12)將糖肽富集材料清洗干凈，并將所述糖肽富集材料填充至所述SPE萃取管內；
(13)將孔徑應小于20um的第二篩板放入所述SPE萃取管內；
(14)使用80％ACN(含0.1％TFA)清洗，得到親水萃取柱。
9.如權利要求7所述的基于糖肽富集材料的富集方法，其特征在于，依次使用1ml的60％ACN(含0.1％TFA)，1ml的40％ACN(含0.1％TFA)，1ml的0.1％TFA洗脫所述糖肽。
10.如權利要求7所述的基于糖肽富集材料的富集方法，其特征在于，使用1ml的80％ACN(含0.1％TFA)清洗所述親水萃取柱且重復五次。
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