[發(fā)明專利]一種羧基乳膠微球的制備方法及應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110282454.2
• 申請(qǐng)日: 2021-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN113150200A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋孟杰;劉照關(guān)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州為度生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C08F212/08
• 分類號(hào): C08F212/08;C08F220/18;C08F220/32;C08F216/14;C08F2/26;G01N33/543
• 代理公司: 蘇州市中南偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32257
• 代理人: 楊慧林

本發(fā)明涉及一種羧基乳膠微球的制備方法，包括以下步驟：將表面活性劑、功能單體一、功能單體二、基礎(chǔ)單體和引發(fā)劑混合攪拌，聚合得到乳膠微球；將乳膠微球清洗、分散，向分散液中加入亞氨基二乙酸的NaOH溶液，攪拌、清洗得到羧基乳膠微球。其中，功能單體一為可水解得到羧基的單體。本發(fā)明的羧基乳膠微球羧基含量高、均一性好，在抗肌紅蛋白抗體分子的偶聯(lián)以及肌紅蛋白檢測(cè)中有較高的反應(yīng)性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及高分子材料技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種羧基乳膠微球的制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

聚合物微球是一種性能優(yōu)良的新型功能材料，近年來(lái),因其具有表面效應(yīng)、體積效應(yīng)、磁效應(yīng)、生物相容性、功能基團(tuán)等特性,在標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量、生物醫(yī)學(xué)、情報(bào)信息、分析化學(xué)、膠體科學(xué)及色譜分離等許多領(lǐng)域具有十分廣泛的應(yīng)用。尤其在聚合物微球上引入各類功能基團(tuán)后，使微球在生物工程、免疫檢驗(yàn)等領(lǐng)域顯示出了良好的應(yīng)用前景。

肌紅蛋白是骨骼肌和心肌特異性氧結(jié)合蛋白，目前肌紅蛋白的免疫檢測(cè)方法主要有乳膠比濁法法、膠體金免疫層析法和化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法等。膠乳增強(qiáng)免疫比濁法由于操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)無(wú)污染而吸引了人們的廣泛關(guān)注，發(fā)展迅速。膠乳增強(qiáng)免疫比濁法是一種基于免疫反應(yīng)原理和納米顆粒的特殊效應(yīng)，檢測(cè)樣本中抗原和抗體，從而引起濁度變化的方法。該方法一般采用抗體包被乳膠微球，包被方式一般采用物理吸附法或化學(xué)偶聯(lián)法，采用物理吸附法得到的抗體包被乳膠微球穩(wěn)定性較差，抗體容易從乳膠顆粒上脫落，測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確且不穩(wěn)定；而化學(xué)偶聯(lián)法中通常先將乳膠官能團(tuán)化然后再與抗體偶聯(lián)，膠乳增強(qiáng)免疫比濁用的乳膠微球多數(shù)為表面羧基修飾，后續(xù)與抗體分子的氨基端通過(guò)EDC/NHS共價(jià)偶聯(lián)，因此，官能團(tuán)密度對(duì)抗體分子的偶聯(lián)結(jié)合效率非常重要。

與活性分子進(jìn)行反應(yīng)的微球表面的功能基團(tuán)可通過(guò)種子法和一步法得到。種子法需通過(guò)多步聚合反應(yīng)，合成微球的方法較為繁瑣，后續(xù)增加羧基含量的流程又較復(fù)雜，大大增加了時(shí)間人力成本，微球形態(tài)也可能受到影響；一步法是在制備微球過(guò)程中直接引入功能單體聚合，該法合成的乳膠微球羧基含量普遍較低。因此仍需要一種羧基含量高、粒徑均一性好、制備工藝簡(jiǎn)單的乳膠微球。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種羧基乳膠微球的制備方法，具有羧基含量高、均一性好、制備簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明的第一個(gè)目的是公開一種羧基乳膠微球的制備方法，包括以下步驟：

(1)將表面活性劑、功能單體一、功能單體二、基礎(chǔ)單體和引發(fā)劑混合攪拌，聚合得到乳膠微球；其中，功能單體一為可水解得到羧基的單體；

(2)將步驟(1)得到的乳膠微球清洗、分散，向分散液中加入亞氨基二乙酸的NaOH溶液，攪拌、清洗得到羧基乳膠微球。

本發(fā)明通過(guò)自由基聚合形成聚合物微球，使用水解可產(chǎn)生羧基的單體以及含環(huán)氧基的單體，這兩類單體在乳液聚合中有更高的聚合效率，能夠更多的聚合在微球表面。后續(xù)在堿性條件下，微球表面的酯基水解得到羧基，環(huán)氧基與亞氨基二乙酸反應(yīng)得到兩個(gè)羧基，使微球表面的羧基含量大大提高。

進(jìn)一步地，亞氨基二乙酸的NaOH溶液和乳膠微球的質(zhì)量比為0.1-1:1。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，以功能單體一、功能單體二和基礎(chǔ)單體的總重為基準(zhǔn)，各組分含量為：功能單體一10-30％、功能單體二10-30％和基礎(chǔ)單體50-80％。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，引發(fā)劑的質(zhì)量為功能單體一、功能單體二和基礎(chǔ)單體總質(zhì)量的0.2-2％。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，表面活性劑的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1-5％。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，功能單體一選自丙烯酸叔丁酯、甲基丙烯酸叔丁酯、丙烯酸環(huán)戊酯和甲基丙烯酸環(huán)戊酯中的一種或多種。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，功能單體二為含環(huán)氧基的單體。