[發(fā)明專利]泥螺多肽在制備骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化促進劑中的用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110279992.6
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN112877287B
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 不公告發(fā)明人
• 申請（專利權(quán)）人: 北京中衛(wèi)醫(yī)正科技有限公司;北京中衛(wèi)醫(yī)正腫瘤醫(yī)學(xué)研究有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;C12N5/077;C12P21/06;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 南京中高專利代理有限公司 32333
• 代理人: 盧丹丹

本發(fā)明屬于干細(xì)胞技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及泥螺多肽在制備骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化促進劑中的用途。本發(fā)明通過如下制備方法制備出一種泥螺多肽：將泥螺洗凈，取軟體組織，凍干粉碎，加入3倍重量的水，得到泥螺勻漿液；加入0.02倍泥螺勻漿液重量的木瓜蛋白酶，調(diào)節(jié)pH為6，55℃恒溫水浴4小時，得到泥螺酶解液；95℃水浴加熱20分鐘，5000r/min離心取上清，得到粗泥螺提取液；將粗泥螺提取液經(jīng)過孔徑2nm的納濾膜，得到細(xì)泥螺提取液；將細(xì)泥螺提取液置于真空冷凍干燥機中真空冷凍干燥，得到泥螺多肽。通過實驗發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所制備的泥螺多肽能夠有效的促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化。

本案為分案申請，原申請的發(fā)明名稱為一種促進間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的促進劑，原申請的申請日為：2020-06-22，原申請的申請?zhí)枮椋篊N202010576883.6

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于干細(xì)胞技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及泥螺多肽在制備骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化促進劑中的用途。

背景技術(shù)

在骨損傷的臨床治療工作中，治療和預(yù)防大塊骨缺損、術(shù)后骨不連以及骨質(zhì)疏松已經(jīng)成為骨科亟待解決的難題。傳統(tǒng)的植骨手術(shù)損傷大，骨量有限，需要一種創(chuàng)傷小、安全有效的方法代替它，目前組織工程技術(shù)已經(jīng)成為解決骨不連和骨缺損的重要方法，增強骨形成是有效治療骨損傷的重要策略。

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一類具有自我更新以及多向分化潛能的原始細(xì)胞，是體內(nèi)成骨細(xì)胞的主要來源。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖以及成骨分化對于維持成骨細(xì)胞的數(shù)量具有重要的意義。目前，組織工程技術(shù)常常會面臨成骨細(xì)胞不足的問題，因此，尋找新的能夠存進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的物質(zhì)是目前急需解決的問題。

由于海洋生物資源繁多，再生能力強，因此，海洋生物成為活性肽的重要來源。海洋生物因其生活環(huán)境的不同，而擁有獨特的生理性狀，從而存在許多具有特殊生物活性的物質(zhì)，因而具有巨大的開發(fā)潛力。

泥螺屬軟體動物門、泥螺屬，為太平洋西岸海水及咸淡水特產(chǎn)的種類。我國主要在寧波和遼寧的東港產(chǎn)泥螺。泥螺軟體部分含有豐富的蛋白質(zhì)和多肽。目前的研究顯示，泥螺多肽具有抗腫瘤的作用，但是關(guān)于泥螺多肽在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化方面的研究目前尚無。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種泥螺多肽促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的新用途。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種促進間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的促進劑，所述促進劑為泥螺多肽。

優(yōu)選地，所述間充質(zhì)干細(xì)胞為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。

優(yōu)選地，所述泥螺多肽的制備方法如下：

（1）將泥螺洗凈，取軟體組織，凍干粉碎，加入3倍重量的水，得到泥螺勻漿液；

（2）加入0.02倍泥螺勻漿液重量的木瓜蛋白酶，調(diào)節(jié)pH為6，55℃恒溫水浴4小時，得到泥螺酶解液；

（3）95℃水浴加熱20分鐘,5000r/min離心取上清，得到粗泥螺提取液；

（4）將粗泥螺提取液經(jīng)過孔徑2nm的納濾膜，得到細(xì)泥螺提取液；

（5）將細(xì)泥螺提取液置于真空冷凍干燥機中真空冷凍干燥，得到泥螺多肽。

優(yōu)選地，所述促進劑用于促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞。

此外，本發(fā)明提供了一種泥螺多肽在促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的用途。

優(yōu)選地，所述用途包括泥螺多肽在促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化基因ALP、RUNX2和BGLAP表達中的用途。

優(yōu)選地，所述泥螺多肽的制備方法如下：