[發明專利]一種同時測定菊苣中綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法

在審

• 申請號: 202110278534.0
• 申請日: 2021-03-16
• 公開（公告）號: CN112903877A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 尚紅梅;田雨;張南翼;劉夢雪;李欣雨;鮑晨光
• 申請（專利權）人: 吉林農業大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產權代理有限公司 22214
• 代理人: 王丹陽

本發明公開了一種同時測定菊苣中綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，屬于中藥活性成分含量測定技術領域。該方法包括：對照品溶液的制備，供試品溶液的制備和定量分析，采用HPLC法，以等度洗脫的方式，同時測定了菊苣中的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量，波峰分離良好，峰面積大小適宜，進樣一針，20min左右出峰完畢；方法簡便、快捷、準確、成本低、實用范圍廣，易于普及掌握。

技術領域

本發明涉及中藥活性成分含量測定技術領域，尤其涉及一種同時測定菊苣中綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法。

背景技術

菊苣(Cichorium intybus L.)為菊科多年生草本植物。《中國藥典》(2020版)中，菊苣作為維吾爾族習用藥材，主要利用其干燥地上部分或根，具有清肝利膽，健胃消食，利尿消腫的功效，用于濕熱黃疸，胃痛食少，水腫尿少。栽培菊苣有多種用途，葉子可以用作蔬菜和飼料，根可以用來生產菊粉和咖啡替代品。菊苣含有多種酚酸類化合物，如綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸等，具有清除自由基、抗脂質過氧化、保肝利膽、抗菌、抗病毒、增強免疫功能和抗炎作用。目前對菊苣還沒有建立其質量控制方法。開發同時測定菊苣中綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，為菊苣藥用價值的評價和質量控制提供參考依據。

文獻《毛菊苣不同部位中菊苣酸、綠原酸、單咖啡酰酒石酸的含量測定》中，對毛菊苣不同部位(根、莖、種子)中菊苣酸、綠原酸和單咖啡酰酒石酸3種成分進行了含量測定報道。文獻《高效液相色譜法同時測定苣荬菜葉中綠原酸、木犀草苷和菊苣酸的含量》中，建立高效液相色譜(HPLC)法同時測定苣荬菜葉中綠原酸、木犀草苷和菊苣酸的含量的分析方法。文獻《HPLC法同時測定蒲公英中單咖啡酰酒石酸、綠原酸、咖啡酸、菊苣酸的含量》中，建立HPLC法同時測定蒲公英中4種有機酸類成分含量。文獻《HPLC法測定蒲公英中菊苣酸、咖啡酸與綠原酸》中，建立同時測定蒲公英中菊苣酸、咖啡酸和綠原酸的HPLC方法。文獻《HPLC同時測定苦碟子注射液中單咖啡酰基酒石酸、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、菊苣酸的含量》中，建立同時測定苦碟子注射液中5種有機酸類成分含量的HPLC分析方法。以上測定方法均為多種成分同時測定，檢測時間較長(分別為50、50、34、55和40min)，洗脫方式為梯度洗脫，要求測定儀器必須帶梯度洗脫裝置，儀器成本提高，測定范圍受到設備的限制。為提高檢測效率，降低檢測成本，本著檢測指標增加，效率不減、成本不增加的原則，擬將菊苣中綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸采用等度洗脫方式，同時測定。

發明內容

本發明的目的是通過提供一種同時測定菊苣中綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，以實現同時對菊苣有效成分-綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸進行定量分析的目的，同時將測定分析時間縮減至20min左右，實現了定量指標翻倍，節省檢測費用的有益效果。

為實現上述目的，本發明提供了一種同時測定菊苣中綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，該方法采用等度洗脫的方法，包括以下步驟：

步驟一：對照品溶液的制備

分別取綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸對照品，加入溶劑，制成綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸對照品溶液，作為儲備液，其他不同質量濃度的對照品溶液由儲備液稀釋得到；

步驟二：供試品溶液的制備

取菊苣粉末，加入溶劑，真空超聲處理后過濾，取續濾液，過微孔濾膜，即得供試品溶液；

步驟三：定量分析

取對照品溶液和供試品溶液，分別注入高效液相色譜儀，進行測定分析。

優選的，步驟一中所述的溶劑為甲醇-0.5％磷酸溶液，其中甲醇與0.5％磷酸體積比為4:1-3:1；所制成綠原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸對照品溶液濃度為0.125-0.25mg/mL。

優選的，步驟二中所述的菊苣粉末提前過40-60目篩后取5-10g。