[發明專利]一種簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法

在審

• 申請號: 202110278403.2
• 申請日: 2021-03-16
• 公開（公告）號: CN112683830A
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 陶昱恒;黃曹興;張曉彤;陳雨姝;廖吉麗;董昊路;陳養彬;許晨晨
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78;G01N1/28
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 蘇秋麗;邱興天

本發明公開了一種簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，屬于糖生物工程技術領域。將半乳甘露聚糖降解產物水解為單糖，利用DNS法測定單糖含量，以此來對半乳甘露聚糖降解產物進行定量。該定量表征半乳甘露聚糖降解產物的方法，具有準確、易于操作等優點，可在工業生產質量控制以及食品、飼料中半乳甘露聚糖降解產物的定量分析中廣泛推廣應用。

技術領域

本發明屬于糖生物工程技術領域，具體涉及一種簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法。

背景技術

半乳甘露聚糖是一種由甘露糖通過β-1,4-糖苷鍵形成主鏈，半乳糖以α-1,6-糖苷鍵形成支鏈的高聚合度雜多糖，是一種存在于田菁種子等植物中的天然植物多糖，可廣泛應用于食品、飼料、材料、化工等領域。半乳甘露聚糖是一種水溶性多糖，但天然半乳甘露聚糖水溶液具有高粘度的特性，限制了其開發利用。近年來，隨著糖生物工程的興起，半乳甘露聚糖的降解產物因其出色的免疫增強功能而作為功能性添加劑在食品、飼料上的應用受到了普遍關注。據報道，半乳甘露聚糖更容易結合免疫細胞上的受體來激活免疫反應，如Toll樣受體4、甘露糖結合凝集素、甘露糖受體等，這些突出的特征構成了以甘露糖為主鏈的多糖的主要優勢。

半乳甘露聚糖降解產物主要包括低聚物以及單糖。現階段，對于半乳甘露聚糖降解產物的定量主要是通過色譜法實現的，首先將半乳甘露聚糖降解產物進行酸水解，使低聚物降解為單糖，然后通過高效液相色譜或離子色譜對單糖進行定量，同時對未酸解的半乳甘露聚糖酶水解液通過色譜法進行定量，最后通過換算得到低聚物和單糖含量。但高效液相色譜和離子色譜價格高昂，一般實驗室不配備該儀器，因此需要一種簡單、價格低廉、準確的方法。

發明內容

針對現有技術中存在的問題，本發明要解決的技術問題在于提供一種簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，該方法具有準確、價格低廉、易于操作等優點。

為了解決上述問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，將半乳甘露聚糖降解產物酸水解為單糖，利用DNS法測定單糖含量，以此來對半乳甘露聚糖降解產物進行定量。

所述簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，所述半乳甘露聚糖降解產物是指天然植物中的半乳甘露聚糖經生物方法或化學方法降解獲得的降解產物，包括短鏈半乳甘露聚糖、半乳甘露低聚糖以及單糖。

所述簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，對半乳甘露聚糖降解產物水解液離心，去上清液，利用DNS法測定單糖含量，記為C2；同時，半乳甘露聚糖水解液稀釋后利用DNS法測定單糖含量，記為C1；最終半乳甘露聚糖水解液中低聚物含量采用如下公式計算：

。

所述簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，半乳甘露聚糖降解產物采用硫酸或鹽酸水解。

所述簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，半乳甘露聚糖降解產物采用質量分數為8%的硫酸水解。

所述簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，所述半乳甘露聚糖來自田菁種子、瓜爾豆、槐豆或葫蘆巴豆。

所述簡單的半乳甘露聚糖降解產物定量方法，包括以下步驟：

（1）半乳甘露聚糖降解產物在121℃條件下酸水解反應1 h；

（2）半乳甘露聚產物水解反應結束后，離心，去上清液并用蒸餾水定容，利用DNS法測定單糖含量，記為C2；同時，將半乳甘露聚糖水解液稀釋后利用DNS法測定單糖含量，記為C1；最終得到半乳甘露聚糖水解液中低聚物含量。

有益效果：與現有的技術相比，本發明的優點包括：