[發明專利]快速檢測新型冠狀病毒的等溫擴增引物組及其檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202110278370.1
• 申請日: 2021-03-15
• 公開（公告）號: CN112899402B
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發明（設計）人: 張宇;莊林林;馬明;吉永新;王建國
• 申請（專利權）人: 東南大學;徐州淮海生命科學產業研究院有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王艷

1.等溫擴增引物組，其特征在于，所述等溫擴增引物組包括Orf1ab基因引物組和N基因引物組，所述Orf1ab基因引物組包括正向引物Orf1ab-F、反向引物Orf1ab-R和反向引物En-Orf1ab-R；所述N基因引物組包括正向引物N-F、反向引物N-R和反向引物En-N-R，所述正向引物Orf1ab-F序列如SEQ ID NO：1所示，所述反向引物Orf1ab-R序列如SEQ ID NO：2所示，所述反向引物En-Orf1ab-R序列如SEQ ID NO：3所示，所述正向引物N-F序列如SEQ ID NO：4所示，所述反向引物N-R序列如SEQ ID NO：5所示，所述反向引物En-N-R序列如SEQ ID NO：6所示，所述正向引物Orf1ab-F、反向引物Orf1ab-R和反向引物En-Orf1ab-R摩爾比范圍為1：1：1~1：3：3；所述正向引物N-F、反向引物N-R和反向引物En-N-R摩爾比范圍為1：1：1~1：3：3。

2.權利要求1所述的等溫擴增引物組在制備檢測新型冠狀病毒的試劑盒中的應用。

3.一種快速檢測新型冠狀病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1所述的等溫擴增引物組，所述等溫擴增引物組的引物上標記有特定標記物，選自生物素、地高辛、FAM、異硫氰酸熒光素、Cy3或Cy5熒光染料中的一種或幾種。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括等溫擴增緩沖液、BstDNA聚合酶、dNTPs、聚乙二醇、甜菜堿、無酶水、陽性對照和陰性對照。

5.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括熒光免疫層析定量檢測試紙條。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光免疫層析定量檢測試紙條包括底板、吸水紙、硝酸纖維膜、結合墊、樣品墊，所述硝酸纖維膜上設有一條包被有二抗的質控線C線，還設有一條與所述質控線C線平行的包被有抗B抗體的檢測線T線，所述結合墊包被有熒光微球抗A抗體偶聯物，所述抗A抗體和抗B抗體，可選自鏈霉親和素、生物素、抗地高辛抗體或抗熒光染料抗體，所述抗熒光染料抗體可選自抗FAM抗體、抗FITC抗體、抗Cy3抗體、抗Cy5抗體，所述抗B抗體應選用與抗A抗體不同的抗體。

7.根據權利要求3~6任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述等溫擴增引物組中的引物適用同一恒定反應溫度，所述引物反應溫度為60~61℃。