[發明專利]一種氨基酸發酵培養基的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202110274620.4
• 申請日: 2021-03-15
• 公開（公告）號: CN113025667B
• 公開（公告）日: 2022-10-25
• 發明（設計）人: 韓成秀;劉樹蓬;劉磊;高雄偉;張學虎
• 申請（專利權）人: 安徽華恒生物科技股份有限公司;巴彥淖爾華恒生物科技有限公司;合肥華恒生物工程有限公司
• 主分類號: C12P13/08
• 分類號: C12P13/08;C12N1/20;C12R1/13
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種L-纈氨酸發酵培養基的制備方法，包括如下步驟：將分離L-纈氨酸晶體后所收集的L-纈氨酸結晶母液加水稀釋1-5倍，加入新鮮培養基，混合均勻，再加入葡萄糖溶液，制得L-纈氨酸發酵培養基，其中，每立方米L-纈氨酸結晶母液中所加入的新鮮培養基的組成為：酵母膏2-7kg、蛋白胨1-6kg、硫酸銨10-25kg、檸檬酸0.1-2kg、氯化鉀0.1-2kg、硫酸鎂0.5-5kg；

所述L-纈氨酸結晶母液的制備方法包括下述步驟，將L-纈氨酸發酵液經滅菌、分離一、脫色、分離二、濃縮、結晶、分離三的處理后，收集L-纈氨酸晶體和L-纈氨酸結晶母液；

所述L-纈氨酸發酵液由L-纈氨酸生產菌經發酵培養得到；所述L-纈氨酸生產菌選自Sval031菌株、Sval049菌株、Sval065菌株中任一種；所述Sval031菌株保藏編號為CGMCCNo.19456；所述Sval049菌株保藏編號為CGMCC No.19457；所述Sval065菌株保藏編號為CGMCC No. 19458。

2.根據權利要求1所述的制備方法，L-纈氨酸結晶母液加水稀釋后體積：葡萄糖溶液體積為1:0.8-1.2。

3.根據權利要求1所述的制備方法，L-纈氨酸結晶母液加水稀釋后體積：葡萄糖溶液體積為1:0.9-1.1。

4.根據權利要求1所述的制備方法，L-纈氨酸結晶母液加水稀釋后體積：葡萄糖溶液體積為1:1。

5.根據權利要求1所述的制備方法，所述葡萄糖溶液的濃度為200-400g/L。

6.根據權利要求1所述的制備方法，所述葡萄糖溶液的濃度為240~340g/L。

7.根據權利要求1所述的制備方法，所述葡萄糖溶液的濃度為260~300g/L。

8.根據權利要求1所述的制備方法，所述加入新鮮培養基后的L-纈氨酸結晶母液和葡萄糖溶液，分別滅菌后再混合。

9.一種L-纈氨酸的發酵方法，包括下述步驟，將L-纈氨酸生產菌種子培養液按照0.5-10%的接種量接種到L-纈氨酸結晶母液制得的發酵培養基中，在35-37℃條件下發酵，至殘糖量小于0.05g/L，獲得L-纈氨酸發酵液；

所述L-纈氨酸生產菌選自Sval031菌株、Sval049菌株、Sval065菌株中任一種；所述Sval031菌株保藏編號為CGMCC No.19456；所述Sval049菌株保藏編號為CGMCC No.19457；所述Sval065菌株保藏編號為CGMCC No. 19458；

所述發酵培養基通過權利要求1-8任一項所述L-纈氨酸發酵培養基的制備方法制備得到。

10.根據權利要求9所述的發酵方法，所述L-纈氨酸生產菌種子培養液的培養方法，包括下述步驟：將L-纈氨酸生產菌按照接種量為0.5-5%接種到LB培養基中，將其置于35-37℃、180-220r/min、pH6-7條件下培養至OD值2-4，得到LB種子液；將LB種子液按照0.5-5%接種量轉接至合成培養基中，將其置于35-37℃、180-220r/min、pH6-7條件下培養至OD值3-4，即得。

11.根據權利要求9-10任一項所述的發酵方法，所得L-纈氨酸生產菌種子培養液可重復加入合成培養基中，進行多次培養。

12.根據權利要求11所述的發酵方法，所述多次為≥2次。