[發(fā)明專利]一株定植于豬鼻腔的枯草芽孢桿菌及其抗病毒活性的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110273828.4
• 申請日: 2021-03-15
• 公開（公告）號: CN112680388B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊倩;李云鋒;李昱辰
• 申請（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N5/071;C12N5/0784;A61K35/742;A61K9/00;A61P31/14;C12R1/125
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

本發(fā)明公開了一株定植于豬鼻腔的枯草芽孢桿菌及其抗病毒活性的應(yīng)用。本發(fā)明涉及的豬源枯草芽孢桿菌NS15，保藏編號為CGMCC No.20344。所述的枯草芽孢桿菌NS15在制備治療和/或預(yù)防豬流行性腹瀉病毒的鼻腔給藥制劑中的應(yīng)用。所述的枯草芽孢桿菌NS15在制備增強(qiáng)豬鼻腔黏膜先天性免疫的益生菌制劑中的應(yīng)用。通過體內(nèi)外試驗首先證明枯草芽孢桿菌NS15在豬鼻腔黏膜中具有較好的粘附和定植能力，能通過分泌細(xì)胞外基質(zhì)成分粘附PEDV，阻止病毒入侵宿主細(xì)胞，能誘導(dǎo)仔豬產(chǎn)生高效的鼻腔黏膜先天性免疫反應(yīng)。綜上，該枯草芽孢桿菌菌株有望開發(fā)成為抵御病毒經(jīng)鼻入侵感染機(jī)體的一種益生菌制劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株定植于豬鼻腔的枯草芽孢桿菌及其抗病毒活性的應(yīng)用，屬于生物防控技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

1.傳染性病原通過豬鼻腔感染的研究現(xiàn)狀

引起豬傳染病的病原微生物絕大多數(shù)通過呼吸道和消化道黏膜入侵，其中經(jīng)呼吸道感染尤其是通過鼻腔入侵機(jī)體的的病原近年來在我國引起了廣泛關(guān)注，如豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine respiratory and reproductive syndrome virus，PRRSV）、豬偽狂犬病毒（Porcine pseudorabies virus，PRV）、豬流感病毒（Swine influenza virus，SIV）、豬肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae of swine，MPS）、豬流行性腹瀉病毒（Porcineepidemic diarrhea virus，PEDV）以及副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis，Hp）等。這些病原微生物能通過飛沫和空氣傳播，在豬群中易形成爆發(fā)性疫情，給防控帶來巨大挑戰(zhàn)，嚴(yán)重阻礙我國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。

2. 豬鼻腔黏膜免疫的研究現(xiàn)狀

鼻腔黏膜作為上呼吸道直接與外界相通的部位，是許多病原入侵和感染的重要入口。通過在鼻腔誘導(dǎo)黏膜免疫反應(yīng)能直接切斷病原微生物的入侵途徑，對于呼吸道傳染病的有效預(yù)防具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)鼻腔免疫不僅能有效誘導(dǎo)呼吸道局部黏膜免疫反應(yīng)，其還兼具抗原使用量少、免疫反應(yīng)閾值低、對動物產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)小且不受消化酶降解等優(yōu)點，這使得近年來鼻腔免疫在動物疫病的防控中受到廣泛關(guān)注，目前國外已有應(yīng)用鼻腔黏膜免疫來預(yù)防PRRSV、PRV和SIV等豬呼吸道傳染性疾病的研究報道。

豬鼻腔黏膜在長期進(jìn)化下形成了較強(qiáng)的黏膜先天性免疫力，能夠抵抗多種病原的入侵。但最近的研究發(fā)現(xiàn)，隨著大型集約化養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，豬鼻腔黏膜先天性免疫力逐漸退化，抵抗病原入侵的能力明顯降低。相反，生態(tài)放養(yǎng)的豬群仍維持較高的鼻腔黏膜免疫水平，其對多種病原感染都具有較強(qiáng)的抵抗力。這主要是由于野外土壤中分布有種類復(fù)雜的微生物，野外放養(yǎng)的豬群通過與自然環(huán)境中的微生物頻繁接觸，使得較多有益微生物進(jìn)入并定植于鼻腔前庭中，誘導(dǎo)鼻腔黏膜產(chǎn)生高水平的先天性免疫保護(hù)力。

3. 枯草芽孢桿菌作為益生菌的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用

枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）是廣泛存在于土壤和植物中的優(yōu)勢生物種群，隸屬于芽孢桿菌科、芽孢桿菌屬。該菌具有較強(qiáng)的抗逆性和生存能力，且因其能顯著增強(qiáng)腸道黏膜免疫力，被作為飼料添加劑廣泛使用。但由于鼻腔黏膜物理屏障的存在如黏液的分泌，導(dǎo)致一些枯草芽孢桿菌進(jìn)入鼻腔后難以在黏膜處定植，無法維持長效的免疫增強(qiáng)作用。

4. 豬鼻腔上皮細(xì)胞離體培養(yǎng)模型的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用