[發明專利]一種鼠源生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC的構建方法及其應用

有效

• 申請號: 202110272528.4
• 申請日: 2021-03-12
• 公開（公告）號: CN113025577B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 賈旺;康鵬;原林皓
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬北京天壇醫院
• 主分類號: C12N5/095
• 分類號: C12N5/095;C12Q1/02;C12R1/91
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 李紅偉;孟祥斌

本發明公開了一種鼠源生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC的構建方法及其應用。本發明以無血清培養基為前提，通過添加EGF、FGF及相關營養物質，成功建立了以GH3細胞系為基礎的生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC，該細胞系具有干細胞的特性，可穩定傳代，同時具有高體外成球能力和高體內致瘤能力，可用于制備腫瘤動物模型，為生長激素型垂體腺瘤的發生發展分子機制的研究、藥物的開發與篩選及診斷試劑的研發提供了有力的工具，是生長激素型垂體腺瘤基礎研究和臨床前期應用的理想細胞系。

技術領域

本發明屬于細胞培養領域，具體而言，涉及一種鼠源生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC的構建方法及其應用。

背景技術

垂體腺瘤的發病率在顱內腫瘤中排名第三，雖然絕大多數垂體腺瘤為良性病變，但卻長期困擾著大量的患者。其中，約12％的垂體腺瘤患者表現為外周血生長激素升高，通過IGF-1和GH的作用，患者常表現為肢端肥大，通常伴有嘴唇，舌頭，鼻子，手和腳的增大，骨骺未融合的幼兒患者則會表現為巨人癥，這種垂體腺瘤稱為生長激素型垂體腺瘤(Growthhormone-pituitary adenoma，GH-PA)。 GH-PA是臨床上常見的功能性垂體腺瘤，僅次于泌乳素型垂體腺瘤，占垂體腺瘤的10％-15％。腫瘤本身占位效應導致患者頭痛，垂體功能低下和視野缺陷， GH-PA也是肢端肥大癥最常見(99％)的病因。GH-PA雖病程進展緩慢，但常常并發心肌肥厚、高血壓、糖尿病、呼吸暫停綜合征等慢性并癥，嚴重危害患者的健康和生活質量。

大部分情況下，GH-PA的首選治療是經蝶竇外科切除腺瘤，但由于一些侵襲性腫瘤及巨大腺瘤的存在，無法完全切除，殘留腫瘤的再生使該病有復發的可能，需要聯合放療和化療。在少數情況下，一些學者認為，藥物可以作為治療 GH-PA的首選，包括麥卡角林、生長激素受體拮抗劑和生長抑素類似物等。但對于GH-PA侵犯海綿狀腫瘤，放療效果在腫瘤減少和生物緩解率方面均較差，同時藥物治療存在不良反應。雖然GH-PA是良性腫瘤，但治療效果仍不容樂觀，深入研究GH-PA的發病機制具有重要意義。GH-PA的發病機制復雜，同時，由于活檢病理的不可取性、缺乏分泌功能性激素的人類垂體細胞系和難以重塑激素分泌或非功能性人垂體腫瘤表型的動物模型等原因，人類垂體腫瘤發病機制目前仍尚未完全闡明。

大量的研究表明腫瘤的發生與增殖取決于腫瘤組織中的一小部分具有干細胞特性的細胞，即腫瘤干細胞(Cancer stem cells，CSCs)，腫瘤干細胞的存在是腫瘤無限增殖的重要機制，目前，已經證實垂體腺瘤中亦存在腫瘤干細胞，具有增殖、多向分化的潛能。雖然相關研究學者對生長激素型垂體腺瘤進行了大量的研究，但是對于GH-PA發生發展的分子機制仍未闡明。在現今臨床和科研應用中均缺乏較為成熟的垂體瘤干細胞細胞系，也是目前臨床和科研應用中亟需解決的技術問題。本發明針對目前該領域存在的上述問題，以無血清培養基為前提，通過添加EGF、FGF及相關營養物質，成功建立了以GH3細胞系為基礎的生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC(GH3 stem cell，簡稱為GH3SC)?？蔀橄乱徊教剿鞔贵w腺瘤的發生發展機制及治療過程提供實驗材料。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術存在的缺陷，提供一種鼠源生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC，具體涉及一種鼠源生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC的構建方法及其應用。

本發明構建的鼠源生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系GH3SC可穩定傳代，具有腫瘤干細胞的特性、高的體外成球能力和高的體內致瘤能力，該細胞系可用于生長激素型垂體腺瘤發生發展分子機制的研究、藥物的開發與篩選、診斷試劑的研發、生長激素型垂體腺瘤相關的新的生物標志物的發現及耐藥機理的研究中，是生長激素型垂體腺瘤基礎研究和臨床前期應用的理想細胞系。

根據本發明的第一個方面，本發明提供了一種鼠源生長激素型垂體腺瘤干細胞細胞系，其特征在于，所述細胞系命名為GH3SC，于2020年11月30日由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物保藏中心保藏，保藏號為CGMCC No.21017；