[發明專利]桂枝芍藥知母湯組合物的指紋圖譜構建方法和檢測方法

有效

• 申請號: 202110271446.8
• 申請日: 2021-03-12
• 公開（公告）號: CN113049724B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 徐彤彤;劉青;林碧珊;張文芳;袁春平;魏梅;孫冬梅;梁浩明;曾杉;朱德全
• 申請（專利權）人: 國藥集團廣東環球制藥有限公司;廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86
• 代理公司: 佛山市禾才知識產權代理有限公司 44379
• 代理人: 梁永健

本發明公開了一種桂枝芍藥知母湯組合物的指紋圖譜構建方法和檢測方法，該指紋圖譜構建方法包括以下步驟：(1)精密稱定桂枝芍藥知母湯組合物，加水后以超聲波處理，得到供試品溶液；(2)將沒食子酸、兒茶素、芍藥內酯苷、鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿等22種對照品制成參照物溶液；(3)精密吸取供試品溶液和各參照物溶液，注入超高效液相色譜儀進行色譜分析，檢測波長為210nm，得到供試品指紋圖譜和參照物色譜圖譜，制定桂枝芍藥知母湯組合物的標準指紋圖譜。通過該標準指紋圖譜可全面的反應待檢測產品的質量，能夠有效的控制桂枝芍藥知母湯制劑的產品質量。

技術領域

本發明涉及中藥質量檢測技術領域，尤其涉及一種桂枝芍藥知母湯組合物的指紋圖譜構建方法和檢測方法。

背景技術

桂枝芍藥知母湯屬于2018年國家中醫藥管理局會同國家藥品監督管理局制訂《古代經典名方目錄（第一批）》中的100首經典名方之一。出自東漢名家張仲景《金匱要略》一書，該方由桂枝、附子（炮）、芍藥、麻黃、生姜、白術、知母、防風和甘草九味藥組成。其中桂枝和附子為君藥，桂枝辛甘溫，溫通經脈，善利關節而祛風邪；附子辛甘大熱，為通十二經純陽之要藥；兩藥合用能祛風除濕以通脈，溫經散寒以助陽。麻黃、防風、白術為臣藥，麻黃辛微苦溫，防風辛甘微溫，白術苦甘溫，三者合用能疏風散寒，祛濕止痛。知母、芍藥和生姜為佐藥，知母清熱滋陰，白芍養血和營，生姜和胃止嘔。甘草為使藥，調和諸藥。本方具祛風除濕，溫經宣痹，養陰清熱之功，以桂枝、芍藥、知母在方中的特殊性而命名，稱之為桂枝芍藥知母湯。

經典名方是指至今仍廣泛應用、療效確切、具有明顯特色與優勢的古代中醫典籍所記載的方劑。中藥湯劑是傳統中醫臨床用藥的主流，其中的經典名方更是中醫藥數千年臨床實踐的結晶，具有組方合理、療效確切、安全性高等特點，為中醫藥理論的精髓之一，但煎煮、攜帶不便，標準難以統一，嚴重影響其臨床應用，因此簡便易用、滿足現代生活節奏的經典名方標準顆粒的研發意義重大。經典名方臨床療效確切，運用現代分析技術對其質量進行控制，不僅保障了復方制劑的質量穩定，也能更好的促進經典名方的臨床應用。

現有技術中也有關于桂枝芍藥知母湯指紋圖譜檢測方法的研究，如專ZL201910285906 .5桂枝芍藥知母湯的檢測方法，以沒食子酸、芒果苷、芍藥苷、升麻素苷、甘草苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、肉桂酸和甘草酸銨為對照品，以50％甲醇提取桂枝芍藥知母湯的成分，色譜條件的檢測波長為254nm。然而，桂枝芍藥知母湯由九味藥制成，其中的化學成分多達幾十甚至上百種，僅以八個化學對照品檢測該藥劑的質量，不能有效的進行質量控制。而且，該專利中以50％甲醇提取桂枝芍藥知母湯的成分和以254nm波長進行檢測，也影響質量控制的有效性。

發明內容

本發明的目的在于提出一種桂枝芍藥知母湯組合物的指紋圖譜構建方法和檢測方法，能夠有效的控制桂枝芍藥知母湯制劑的產品質量。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：

一種桂枝芍藥知母湯組合物的指紋圖譜構建方法，包括以下步驟：

（1）精密稱定桂枝芍藥知母湯組合物，加水后以超聲波處理，得到供試品溶液；

（2）將沒食子酸、兒茶素、芍藥內酯苷、芍藥苷、1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖、肉桂醇、肉桂酸、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷、5-羥甲基糠醛、新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、白術內酯、白術內酯、6-姜辣素、芹糖甘草苷、甘草苷、甘草素、異甘草苷、甘草酸銨、新芒果苷、芒果苷、鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿對照品制成參照物溶液；

（3）精密吸取供試品溶液和各參照物溶液，注入超高效液相色譜儀進行色譜分析，檢測波長為210nm，得到供試品指紋圖譜和參照物色譜圖譜，制定桂枝芍藥知母湯組合物的標準指紋圖譜。

進一步的，所述步驟（3）中，色譜條件如下：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，流速0.25ml/min，柱溫：30℃；