[發明專利]一種葉酸對映異構體含量的檢測方法

在審

• 申請號: 202110270768.0
• 申請日: 2021-03-12
• 公開（公告）號: CN113063889A
• 公開（公告）日: 2021-07-02
• 發明（設計）人: 解艷;王黎雯;張磊
• 申請（專利權）人: 北京斯利安藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/96
• 分類號: G01N30/96;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 夏菁

1.一種葉酸對映異構體含量的檢測方法，其特征在于，檢測條件為：

色譜柱采用陰離子交換手性色譜柱；

流動相由組分A、B、C組成；

所述組分A包括甲醇和/或乙腈；

所述組分B選自冰醋酸、丙酸、苯甲酸、苯乙酸或三氟乙酸；

所述組分C包括三乙胺和/或二乙胺。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，包括：

S1)對照品溶液及供試品溶液的制備：稱取葉酸對映異構體對照品，用28.6g/L碳酸鈉溶液溶解，并采用0-80％甲醇定容成一定濃度的對照品溶液；

稱取葉酸供試品，用28.6g/L碳酸鈉溶液溶解，并采用0-80％甲醇定容得到供試品溶液；

S2)色譜條件：

色譜柱采用陰離子交換手性色譜柱；

流動相由組分A、B、C組成；

所述組分A包括甲醇和/或乙腈；

所述組分B選自冰醋酸、丙酸、苯甲酸、苯乙酸或三氟乙酸；

所述組分C包括三乙胺和/或二乙胺；

S3)測定方法：

將所述的對照品溶液及供試品溶液按照所述的色譜條件依次進樣，記錄色譜圖，根據對照品溶液的峰位置定位供試品溶液中葉酸對映異構體的峰位置，按照面積歸一化法計算供試品中葉酸對映異構體的含量。

3.根據權利要求1或2所述的檢測方法，其特征在于，所述組分A、B、C的體積比為(100～98)：(1.2～0.8)：(1.2～0.8)。

4.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，所述組分A、B、C的體積比為100:1:1。

5.根據權利要求1或2所述的檢測方法，其特征在于，所述甲醇和乙腈的體積比為(100～50)：(0～50)；

所述三乙胺和二乙胺的體積比為(100～0)：(0～100)。

6.根據權利要求1或2所述的檢測方法，其特征在于，檢測波長為260～300nm；

流動相流速為0.8～1.2ml/min；

柱溫為20～40℃；

進樣量為5～20μl。

7.根據權利要求6所述的檢測方法，其特征在于，檢測波長為280nm；

流動相流速為1.0ml/min；

柱溫為30℃；

進樣量為20μl。

8.根據權利要求1或2所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜柱為大賽璐CHIRALPAKQN-AX離子交換柱。

9.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，待測樣品經過預處理：

采用28.6g/L的碳酸鈉溶液，使待測樣品溶解，然后用0-80％甲醇稀釋，制成濃度為0.2mg/ml～1.0mg/ml的待測溶液。