[發明專利]一種快速判定紅茶等級的方法

在審

• 申請號: 202110259651.2
• 申請日: 2021-03-10
• 公開（公告）號: CN112946156A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 蔡薈梅;帥夢穎;彭傳燚;陳貴杰
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/86
• 代理公司: 北京悅和知識產權代理有限公司 11714
• 代理人: 田昕

本發明涉及一種利用高效液相色譜檢測實現紅茶等級判定的方法，屬于茶葉等級領域。具體步驟為：將已知不同等級的紅茶粉末樣品中加入95~100℃的沸水中提取，過0.20~0.25μm的濾膜，得到紅茶樣液；采用峰面積歸一化法測得10種成分的含量；將紅茶樣液中所述十種成分含量的數據標準化處理，再進行無監督的主成分分析，之后進行有監督的偏最小二乘判別分析，在偏最小二乘判別分析的基礎上進行層次聚類分析，最后建立基于高效液相色譜法的茶葉等級區分模型。本發明方法簡單，準確高效，不受紅茶品種的影響。

技術領域

本發明屬于紅茶等級判定技術領域，具體涉及一種基于高效液相色譜法的紅茶等級劃分方法。

背景技術

茶葉是源于中國的全球四大飲料之一，飲茶不僅是生活中的休閑方式，更是良好的保健方式。茶葉中富含抗氧化功能的多酚類化合物，能夠有效清除人體產生的有害自由基，延緩組織衰老，降低心血管疾病的發生。茶葉一般分為綠茶（非發酵)，烏龍茶(半發酵)，紅茶(發酵)三種。兒茶素和茶黃素是紅茶中的主要多酚，它們是評價紅茶質量的指標多酚。兒茶素是茶葉中最豐富的多酚。 紅茶通常比綠茶具有更低的兒茶素水平，因為在制造過程中，兒茶素在發酵過程中被氧化和聚合。紅茶因為是全發酵的，因此具有高含量的茶黃素。紅茶中主要的非揮發性成分有多酚類物質和生物堿（咖啡堿和可可堿），其等級與這些多酚類物質以及生物堿的含量有著密不可分的關系。隨著人們生活水平的逐漸提高，對于紅茶品質的要求也越來越高。由于市場監管不利以及商家利益驅使，名優茶市場時常出現紅茶以次充好，以假亂真的現象，嚴重損害消費者利益并對國內茶文化的發展產生不良影響。人工感官評審通常應用于對紅茶質量等級進行評價，但是評審結果容易受到評審員生理狀態，心理狀態以及評審環境的影響，因此難以滿足當下茶葉品質檢測中對檢測精度以及重復性的要求。

為避免感官評審的主觀性，各種基于茶葉內在成分差異的分析方法不斷被提出。與傳統的感官分析相比，化學分析技術能夠提供更客觀且精度較高的檢測結果。前期研究發現，不同產區或產地茶葉等級差異主要取決于主要成分和礦物元素含量，但對于同一產區的不同等級茶葉，其主要成分含量相近，只有少數特征成分之間存在差異。因此，可通過選擇特征成分以減少實際茶葉品質分析化學指標，降低檢測成本和檢測時間，并提高相應模型分析精度。高效液相色譜法可以分離和鑒定物質組分，它主要通過分離鑒定紅茶中的非揮發性成分，進行定性和定量分析，從而實現對茶葉品質等級的鑒別，但是茶葉品質是由多個因素共同決定的，因此通過高效液相色譜對茶葉生物活性成分進行定量和綜合比較，再用多變量分析軟件找到不同等級紅茶的主要差異物質并進行定性分析，為茶葉分級分類提供了一種新的策略，對于茶葉品質等級鑒別有更重大的意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種紅茶等級的劃分方法。本發明所述的方法具有簡單、靈敏、高效等優點。

為實現上述發明目的，本發明采用如下技術方案：

1、高效液相色譜標準儲備液配制：十個標準品分別是四種兒茶素：表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素(EC)、表沒食子兒茶素沒食子酸脂（ECG）、表兒茶素沒食子酸脂（EGCG）；四種茶黃素：茶黃素（TF1），茶黃素-3-沒食子酸脂（TF2A），茶黃素-3-沒食子酸脂（TF2B），茶黃素-雙-沒食子酸脂（TF3）；可可堿和咖啡堿。精確稱量十種標準品各 10 mg，迅速放于5mL離心管中加入蒸餾水稀釋，得到濃度為 2 mg/ m L 標準品儲備液，置于-40℃備用。

2、標準溶液配制：分別配制可可堿和咖啡堿、表兒茶素(EC)、表沒食子兒茶素沒食子酸脂（ECG）為60，80，100，120(單位：mg/ L)，表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素沒食子酸脂（EGCG）、茶黃素（TF1）、茶黃素-3-沒食子酸脂（TF2A）、茶黃素-3-沒食子酸脂（TF2B）和茶黃素-雙-沒食子酸脂（TF3）為120，180，200，240(單位：mg/ L)，再用 0.22μm 有機系微孔濾膜過濾，HPLC 檢測繪制標準曲線。