[發明專利]一種測定極低密度脂蛋白亞組份成分分布的方法

在審

• 申請號: 202110259170.1
• 申請日: 2021-03-10
• 公開（公告）號: CN113008807A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 李捷;任麗;秦迪
• 申請（專利權）人: 譜天（天津）生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/25
• 分類號: G01N21/25;G01N21/59;G01N24/08
• 代理公司: 南京中律知識產權代理事務所(普通合伙) 32341
• 代理人: 沈振濤

本發明公開了一種測定極低密度脂蛋白(VLDL)亞組份及其成分分布的方法，包括以下步驟：(1)根據VLDL的密度，將總VLDL劃分為2?5個亞組分，并測定每個亞組分中甘油三酯、膽固醇、游離膽固醇、磷脂的含量；(2)計算每個亞組分中甘油三酯與各個亞組分中總甘油三酯的比值，膽固醇、游離膽固醇、磷脂按照同樣方法計算比值，得到VLDL的成分在每個亞組份中的分布情況；(3)根據個體時間/干預進程，進行多次測量，比較各成分分布的變化情況。在個體疾病或脂代謝異常時，總極低密度脂蛋白檢測結果穩定的情況下，本發明方法能夠根據甘油三酯、膽固醇、游離膽固醇、磷脂在亞組分中的分布變化規律，反映出個體脂代謝的變化狀態。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體地，涉及一種測定極低密度脂蛋白亞組份及其成分分布的方法。

背景技術

肝臟是脂肪代謝重要器官，極低密度脂蛋白(VLDL)是肝臟最為重要的脂代謝載體：極低密度脂蛋白，是由肝臟利用乳糜顆粒、殘粒、膽汁酸、脂肪酸、糖和蛋白質的中間代謝物與肝臟內合成的載脂蛋白組成的一種脂蛋白。VLDL的主要功能是運輸肝臟中合成的內源性甘油三酯。無論是血液運輸到肝細胞的脂肪酸，或是糖代謝轉變而形成的脂肪酸，在肝細胞中均可合成甘油三酯，最終由VLDL運送至肝外器官執行機體全身的脂類代謝，因而VLDL是肝臟參與脂代謝的最為重要的載體。

VLDL大小為30-80nm，含有甘油三酯、膽固醇、游離膽固醇、磷脂和蛋白成分(ApoB100為主)，在總VLDL中甘油三酯(TG)約占60％，膽固醇(TC)約占20％，載脂蛋白約占10％，其他成份約10％，成分占比相對固定。

使用超速離心或核磁共振等方法可根據密度對總VLDL進行亞組份劃分，將VLDL分為2-5個組分，并可通過測量得到每個亞組份中的成分含量(甘油三酯、膽固醇、游離膽固醇、磷脂)，但測定結果無公認正常范圍，個體波動大，無法得到有效應用。

發明內容

發明目的：本發明的目的在于提供一種測定極低密度脂蛋白亞組份成分分布的方法，該方法針對血液樣本中VLDL亞組份成分進行檢測后，對亞組份及其各成分的占比進行計算，通過自身總VLDL檢測值指標對個體化差異進行歸一，可在多次檢測中對個體的變化進行監控，變化趨勢與基線進行對比，可反映個體的代謝及疾病狀況。

技術方案：本發明提供一種測定極低密度脂蛋白亞組份成分分布的方法，包括以下步驟：

(1)根據VLDL密度，將總VLDL劃分為2-5個亞組分，并測定每個亞組分中甘油三酯、膽固醇、游離膽固醇、磷脂的含量；

(2)計算每個亞組分中甘油三酯與各個亞組分中總甘油三酯的比值，膽固醇、游離膽固醇、磷脂按照同樣方法計算比值，得到VLDL的成分在每個亞組份中的分布情況；

(3)根據個體時間/干預進程，進行多次測量，比較中各成分分布的變化情況。

作為優選：

步驟(1)中使用超速離心法對總VLDL進行亞組份劃分(4個亞組分)，然后采用比色法和比濁法測定每個亞組分中甘油三酯、膽固醇、游離膽固醇、磷脂的含量。

或者，使用核磁共振法進行檢測，利用脂蛋白鏈-CH₃及-CH₂-信號群的積分對脂蛋白各亞類進行定量(劃分為5個亞組分)，并從檢測指標中提取VLDL亞組分及各成分的定量信息。

所述方法能夠根據甘油三酯、膽固醇、游離膽固醇、磷脂在亞組分中的分布變化規律，反映出個體脂代謝的變化狀態。

步驟(3)中所述干預包括手術或者藥物。

本發明使用空腹血液樣本，離心去除血細胞，得到血清/血漿，將血清/血漿與緩沖液等量配比/超速離心分離后，轉入檢測管中等待檢測，樣本前處理步驟簡單、試劑穩定性高，兼容性好，能夠為后續檢測提供穩定的檢測信號樣本環境。