[發明專利]一種硫氧化博斯氏菌、硝基還原酶及其應用

在審

• 申請號: 202110258716.1
• 申請日: 2021-03-10
• 公開（公告）號: CN115074263A
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 張琴;豐亞輝;王仲清;李麗妮;梁錫裕;楊虎;盧松泉;羅忠華;黃芳芳
• 申請（專利權）人: 廣東東陽光藥業有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00;C12R1/01;C12R1/19
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1.一種硫氧化博斯氏菌，其保藏編號為CGMCC NO.21795。

2.一種硝基還原酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

3.一種基因，所述基因編碼權利要求2所述的硝基還原酶。

4.根據權利要求3所述的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

5.一種質粒，其特征在于，所述的質粒攜帶有權利要求3-4任一項所述的基因。

6.一種基因工程菌，所述基因工程菌含有權利要求2所述硝基還原酶或權利要求3-4任一項所述的基因或權利要求5所述質粒。

7.一種權利要求1所述硫氧化博斯氏菌、權利要求2所述硝基還原酶、權利要求3-4任一項所述基因或權利要求6所述基因工程菌將硝基催化為氨基的應用。

8.一種式B化合物的制備方法，

其包括：式A化合物在酶催化體系存在下，在緩沖溶液中進行反應，經后處理，得到式B化合物；其中，所述酶催化體系生物催化劑，所述生物催化劑包含權利要求1所述硫氧化博斯氏菌、權利要求2所述硝基還原酶和權利要求6所述基因工程菌中的至少一種。

9.根據權利要求8所述的方法，所述酶催化體系還包含輔酶循環系統，所述輔酶循環系統為以下至少一種：(1)乳酸脫氫酶輔酶循環系統：包含乳酸脫氫酶，乳酸和輔酶；(2)葡萄糖脫氫酶輔酶循環系統：包含葡萄糖脫氫酶，葡萄糖和輔酶。

10.根據權利要求9所述的方法，所述輔酶包括還原性輔酶Ⅰ或還原性輔酶Ⅱ。

11.根據權利要求8-10任一項所述的方法，所述反應的溫度為15℃-45℃；或者所述反應的溫度為30℃。

12.根據權利要求8-11任一項所述的方法，所述緩沖溶液的pH為6.0-10.0，或6.5-8.0，或7.0；和/或所述緩沖溶液包括磷酸鹽緩沖液；和/或所述式A化合物投料后的濃度為5mmol/L-200mmol/L或20mmol/L-100mmol/L。