[發(fā)明專利]一種利用分光光度法測定多酚化合物與金屬離子絡(luò)合反應(yīng)化學(xué)計量比的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110256054.4
• 申請日: 2021-03-09
• 公開（公告）號: CN113029982A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張亮亮;張禾;湯麗華;徐曼;胡新宇;汪詠梅
• 申請（專利權(quán)）人: 中國林業(yè)科學(xué)研究院林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G16C20/10
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32249
• 代理人: 馮慧

一種利用分光光度法測定多酚化合物與金屬離子絡(luò)合反應(yīng)化學(xué)計量比的方法。步驟為：(1)分別配置等摩爾濃度的多酚溶液和金屬離子溶液及反應(yīng)緩沖液；(2)分別向1mL比色皿中加入0?20μL金屬離子溶液及20?0μL多酚溶液，使得每次加入的金屬離子溶液和多酚溶液總體積保持為20μL不變，然后補加反應(yīng)緩沖液至1mL，充分混合，放置1?2min；(3)每次混合后，用分光光度計測定反應(yīng)溶液在330nm下的吸光度值；(4)收集每次測定的吸光度值，利用MatLab軟件進行四項式曲線模擬，得到曲線最高點對應(yīng)的X值，即為絡(luò)合物的化學(xué)計量比。本發(fā)明技術(shù)操作簡單、便捷、對儀器設(shè)備要求低、穩(wěn)定性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種利用分光光度法測定多酚化合物與金屬離子絡(luò)合反應(yīng)化學(xué)計量比的方法，屬于化學(xué)分析技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

絡(luò)合沉淀金屬離子是多酚化合物的重要特性之一。許多金屬離子在有機體內(nèi)具有重要的生理作用，多酚化合物通過與這些金屬離子形成結(jié)構(gòu)緊密的絡(luò)合物從而影響它們的生物活性。多酚化合物絡(luò)合金屬離子能力來源于多酚化合物中的鄰苯二酚和棓?；Y(jié)構(gòu)。

在金屬離子存在的條件下，酚羥基首先發(fā)生去質(zhì)子化，然后與金屬離子以共價鍵形式進行配位反應(yīng)，形成多酚-金屬離子絡(luò)合物。

本發(fā)明技術(shù)利用等摩爾連續(xù)變化法測定多酚-金屬離子絡(luò)合反應(yīng)的絡(luò)合物化學(xué)計量比。該方法配制的一系列溶液中，金屬離子濃度[M]及配位體濃度[L]同時變化，但兩者總和(C)不變，即：[M]+[L]＝C(其中[L]＝CX，[M]＝C(1-X)，X＝[L]/C，X為摩爾分?jǐn)?shù)，C為常數(shù)，即兩者濃度總和)。改變混合物中多酚化合物配體與金屬離子的濃度(保持混合物中多酚化合物配體和金屬離子的總濃度不變)，混合溶液的紫外吸光度值也隨之改變。當(dāng)混合物中配體與金屬離子摩爾濃度達(dá)到絡(luò)合物化學(xué)計量比時混合物在特征吸收波長下具有最大吸光度值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種利用分光光度法測定多酚化合物與金屬離子絡(luò)合反應(yīng)化學(xué)計量比的方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種利用分光光度法測定多酚化合物與金屬離子絡(luò)合反應(yīng)化學(xué)計量比的方法，具體通過以下步驟制備得到：

(1)分別配置1-10mM等摩爾濃度的多酚溶液和金屬離子溶液及反應(yīng)緩沖液；

(2)分別向1mL比色皿中每次加入0、2、4、6、……、20μL金屬離子溶液及20、18、16、14、……、0μL多酚溶液，使得每次加入的金屬離子溶液和多酚溶液總體積保持為20μL不變，然后補加反應(yīng)緩沖液至1mL，充分混合，室溫放置1-2min；

(3)每次混合后，用分光光度計測定反應(yīng)溶液在330nm下的吸光度值，以反應(yīng)緩沖液為空白；

(4)收集每次測定的吸光度值，利用MatLab軟件進行四項式曲線模擬，得到以[M]/[M+PP]([M]＝金屬離子的摩爾濃度，[M+PP]＝金屬離子和多酚化合物的總摩爾濃度)為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)的四項式模擬曲線圖，曲線最高點對應(yīng)的X值，即為絡(luò)合物的化學(xué)計量比。

步驟(1)中所述的反應(yīng)緩沖液為磷酸鹽、檸檬酸鹽、碳酸鹽、醋酸鹽、巴比妥酸鹽、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等緩沖液。

步驟(4)中所述的MatLab軟件進行四項式曲線模擬方程為：

其中：k為級數(shù)，ɑ為曲線與y軸相交的點的數(shù)值，y為混合溶液的吸光度值，x為金屬離子濃度占總濃度的摩爾比例，總濃度為金屬離子濃度+多酚化合物濃度。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明技術(shù)操作簡單、便捷、對儀器設(shè)備要求低、穩(wěn)定性好，可用于多酚化合物與金屬離子的絡(luò)合反應(yīng)的化學(xué)計量比的測定。

附圖說明

圖1茶多酚(Cat)分別與Al³⁺在pH6.0條件下的絡(luò)合反應(yīng)化學(xué)計量比四項式模擬曲線。