[發明專利]一種絕經后骨質疏松模型鼠的方法

在審

• 申請號: 202110255493.3
• 申請日: 2021-03-09
• 公開（公告）號: CN113040965A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 杜永偉;劉真
• 申請（專利權）人: 杜永偉
• 主分類號: A61D1/00
• 分類號: A61D1/00
• 代理公司: 武漢菲翔知識產權代理有限公司 42284
• 代理人: 程玉紅

本發明公開了一種絕經后骨質疏松模型鼠的方法，包括：A.術前準備；B.雙側卵巢切除；C.術后檢測和護理。本發明通過設置一種簡易手術流程的大鼠卵巢切除方法，僅通過針對目標卵巢部位進行組織切除，其方式簡單，具有較強的再現性，無需復雜的術中檢測即可實時建立生物模型，同時經由術前的穩定環境下培育，通過長期觀測和控制變量使大鼠之間的環境因素影響趨于相同，并通過觀測篩去具有隱性疾病的大鼠，且同步觀察父輩骨骼健康狀態，如先天具有隱性骨質疏松的大鼠，防止影響到最終的實驗結果。

技術領域

本發明涉及生物建模領域，特別涉及一種絕經后骨質疏松模型鼠的方法。

背景技術

骨質疏松是中老年人的一種常見病，多并發骨折。由于倫理學的限制，將骨質疏松的研究建立在細胞或動物模型上是更好的選擇，近年來多利用大鼠來構建骨質疏松的動物模型，用于研究骨質疏松疾病的機制。

現有的模型鼠通常建模手段復雜，再現性差，同時無明顯對照組和過渡對照，術前的觀察和檢測減少，容易因前期的生物隱藏性患病和環境因素影響后續建模結構，尤其是骨骼、軟骨、肌腱、毛發等器官輸送營養物質，是保持骨骼健康的主要體液；針對于大鼠的術后處理流程中，僅簡易的清理和消毒也會因為大鼠的創面影響到其本身的健康。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有技術的缺陷，提供一種絕經后骨質疏松模型鼠的方法。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

本發明一種絕經后骨質疏松模型鼠的方法，具體包括如下步驟：

A.術前準備；

選擇健康的9只雌性SD大鼠，月齡均為3-9個月，體重為200-220g，隨機分為兩組，分別為全摘除手術組、半摘除手術組和假手術組；術前每只大鼠分別注射相同劑量的8mg/kg頭孢呋辛和麻醉劑；

B.雙側卵巢切除；

麻醉完畢后用碘伏消毒手術區域，于脊柱兩側背部肋骨下緣開1-2cm豎向切口，采用剪刀依次剪開或鈍性分離皮下組織，可見到白色潤澤的脂肪團，撥開脂肪團褶皺可見粉紅色菜花狀卵巢，提起卵巢顯露輸卵管，提起流程中保持緩慢，隨后維持大鼠骨盆舒展狀態，沿盆腔基底靠近子宮處連帶脂肪組織結扎，切除卵巢及部分輸卵管，結扎后將脂肪組織放回腹腔，再次對另一卵巢采取同樣步驟切除；術后做好防御感染措施，縫合創面；

假手術組手術流程中僅切除卵巢附近的脂肪組織，其他步驟均與全摘除手術組相同；

半摘除手術組中僅切除一側卵巢，另一側僅切除卵巢附近的脂肪組織，保持與全摘除手術組和假手術組的手術步驟相同；

C.術后檢測和護理；

術后按照0.01mg/kg給予大鼠哌替啶，日三次，在三日后則開始檢測大鼠的骨密度和血清參數指標，持續3-6周，分別針對全摘除手術組、半摘除手術組和假手術組記錄不同的數據；

作為本發明的一種優選技術方案，所述步驟A流程中，于手術前1周，大鼠均處于20-26攝氏度，濕度為50-60％環境下，陽光照射充足情況下喂養，同時觀察大鼠母系和父系的長時間健康狀態，并記錄觀察大鼠是否處于處于持續健康狀態。

作為本發明的一種優選技術方案，所述步驟C中還包含有實驗期后安樂死和建模驗證取樣流程，主要采用麻醉安樂后，浸泡于福爾馬林中，用于建模驗證取樣流程中的解剖和骨密度重量檢測。

作為本發明的一種優選技術方案，所述建模驗證取樣還包含有血液采集和血清骨收集，血液于2-3攝氏度下離心采集血清。

與現有技術相比，本發明的有益效果如下：