[發(fā)明專利]一種特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體及其應用與一種試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110255112.1 | 申請日: | 2021-03-09 |
| 公開(公告)號: | CN112961862B | 公開(公告)日: | 2023-02-28 |
| 發(fā)明(設計)人: | 王周平;郭華麟;馬鵬飛;段諾;孫羽菡 | 申請(專利權(quán))人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N15/115 | 分類號: | C12N15/115;G01N33/58;G01N33/53 |
| 代理公司: | 無錫華源專利商標事務所(普通合伙) 32228 | 代理人: | 孫建 |
| 地址: | 214122 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 特異性 識別 曲霉 毒素 優(yōu)化 適配體 及其 應用 試劑盒 | ||
1.一種特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體,其特征在于,所述優(yōu)化適配體為P-30,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體,其特征在于,所述優(yōu)化適配體的5’端或者3’端經(jīng)修飾物修飾。
3.根據(jù)權(quán)利要求2中所述的特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體,其特征在于,所述修飾物為氨基、巰基或羧基。
4.一種如權(quán)利要求1-3中任選一項所述的特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體在檢測棒曲霉毒素中的應用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4中所述的特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體在檢測棒曲霉毒素中的應用,其特征在于,所述應用的方法為:將金納米簇修飾的適配體與棒曲霉毒素混合孵育,之后加入二氧化錳納米片,反應結(jié)束后測反應液熒光信號。
6.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體在檢測棒曲霉毒素中的應用,其特征在于,所述應用方法還包括:反應結(jié)束后反應液中加入DNase Ⅰ內(nèi)切酶。
7.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體在檢測棒曲霉毒素中的應用,其特征在于,所述金納米簇修飾的適配體的制備方法如下:
將L-脯氨酸加入到煮沸的HAuCl4·3H2O溶液中攪拌5-20 min后,將反應混合液冷卻至室溫得到AuNCs,然后加入EDC與NHS活化羧基基團,之后將其與5’端或者3’端經(jīng)修飾物修飾的適配體在25-37 ℃條件下震蕩孵育10 h以上,得到金納米簇修飾的適配體。
8.根據(jù)權(quán)利要求7中所述的特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體在檢測棒曲霉毒素中的應用,其特征在于,所述適配體核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
9.一種棒曲霉毒素檢測試劑盒,其特征在于,包括權(quán)利要求1所述特異性識別棒曲霉毒素的優(yōu)化適配體、二氧化錳納米片與DNase Ⅰ內(nèi)切酶。
10.根據(jù)權(quán)利要求9中所述棒曲霉毒素檢測試劑盒,其特征在于,所述優(yōu)化適配體的5’端或者3’端經(jīng)修飾物修飾。
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