[發明專利]ROCK抑制劑在促進卵母細胞基因Bmp15和Gdf9表達量上調中的應用

在審

• 申請號: 202110253455.4
• 申請日: 2021-03-10
• 公開（公告）號: CN113005075A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 裴秀英;俞曉麗;張櫻馨;王燕蓉;常青;馬會明;楊延周;馬文智;付旭鋒;何瑞;蒲靜;劉心蕊;邱意開;張彥平
• 申請（專利權）人: 寧夏醫科大學
• 主分類號: C12N5/075
• 分類號: C12N5/075;A01N1/02;A61K31/4409;A61P15/00;A61P35/00
• 代理公司: 西安正華恒遠知識產權代理事務所(普通合伙) 61271
• 代理人: 陳選中

本發明公開了一種ROCK抑制劑在促進卵母細胞基因Bmp15和Gdf9表達量上調中的應用。其中，ROCK抑制劑Y27632可促進卵母細胞特異性基因Bmp15和Gdf9表達量上調，促進卵泡細胞增殖發育。本申請采用了無血清培養體系，同時，為了模擬卵泡在體內的生長環境，本研究采用了超低吸附培養板對卵泡進行培養，該培養板不僅可以使卵泡在整個發育過程中呈立體式生長方式，而且使卵母細胞周圍的顆粒細胞得到更充分的營養物質和空間，可以較為有利于腔前卵泡的發育。同時，在添加抑制劑Y27632后，Gdf9和Bmp15表達量提升，有利于促進卵泡增殖發育。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種ROCK抑制劑在促進卵母細胞基因Bmp15和Gdf9表達量上調和防止紡錘體組裝異常中的應用及其試劑盒。

背景技術

卵巢是雌性哺乳動物中重要的生殖內分泌器官，卵泡作為卵巢的基本結構與功能單位，在整個卵巢發育過程中發揮重要作用。近年來，腫瘤患者的年輕化趨勢日益嚴重，雖然不斷更新的醫療技術使這些患者的生存期得以延長，但主流技術放化療嚴重損傷了女性生育能力。因此，放化療前保存卵巢組織或未成熟卵泡，腫瘤愈后回移卵巢組織或卵泡體外成熟培養后，可作為維持女性生育能力或內分泌功能的有效手段。

Rho激酶(ROCK)是GTPase Rho的效應子，可協調多個細胞行為，如細胞增殖、凋亡、分裂、遷移、分化等。Y27632是ROCK通路的抑制劑，在細胞增殖和凋亡中起重要作用。但目前并未見ROCK抑制劑Y27632可提升卵母細胞特異性基因Bmp15和Gdf9表達量的相關記載。

發明內容

針對現有技術中的上述不足，本發明提供一種ROCK抑制劑在促進卵母細胞基因Bmp15和Gdf9表達量上調和防止紡錘體組裝異常中的應用及其試劑盒，本研究擬探討小鼠卵泡自腔前卵泡體外發育為成熟卵泡過程中，Y27632對卵母細胞的成熟及顆粒細胞的增殖等方面的影響，尤其是對卵母細胞特異性基因Bmp15和Gdf9表達量的影響。

為實現上述目的，本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：

ROCK抑制劑在促進卵母細胞特異性基因Bmp15和Gdf9表達量上調中的應用。

進一步地，ROCK抑制劑為ROCK抑制劑Y27632。

一種促進卵母細胞特異性基因Bmp15和Gdf9表達量上調的藥物，包括上述ROCK抑制劑。

一種提升卵母細胞質量促進卵母細胞發育的試劑，該試劑能提升基因Bmp15和Gdf9表達量。

進一步地，試劑包括上述ROCK抑制劑。

一種促進卵母細胞特異性基因Bmp15和Gdf9表達的試劑盒，試劑盒包括上述ROCK抑制劑。

一種防止卵母細胞紡錘體組裝異常的藥物，包括權利要求1或2所述的ROCK抑制劑。

一種卵母細胞冷凍保護劑，包括上述ROCK抑制劑。

一種卵母細胞體外培養試劑，包括上述ROCK抑制劑。

本發明的有益效果：

本申請采用了無血清培養體系，同時，為了模擬卵泡在體內的生長環境，本研究采用了超低吸附培養板對卵泡進行培養，該培養板不僅可以使卵泡在整個發育過程中呈立體式生長方式，而且使卵母細胞周圍的顆粒細胞得到更充分的營養物質和空間，可以較為有利于腔前卵泡的發育。同時，在添加抑制劑Y27632后，Gdf9和Bmp15表達量提升，有利于促進卵泡增殖發育。

附圖說明

圖1為體外培養0、2、4天后的卵泡；

圖2為免疫熒光染色檢測卵母細胞紡錘體微管tubulin的分布；標尺示10μm；