[發明專利]電磁輻射動物腦損傷模型構建方法

有效

• 申請號: 202110253271.8
• 申請日: 2021-03-05
• 公開（公告）號: CN113017902B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 李楊;左紅艷;郝延輝;喻超;劉亞東;胡翠翠;葉雨萌;金星
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: A61D7/00
• 分類號: A61D7/00;A01K29/00
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 卞靜靜

本發明公開了電磁輻射動物腦損傷模型構建方法，包括：設定電磁輻射條件，對試驗動物進行電磁輻射處理；比較電磁輻射處理前后試驗動物的海馬CA2區神經元鈣活動，若鈣活動變化量具有統計學意義，則利用所述電磁輻射條件構建電磁輻射動物腦損傷模型。本發明能夠較好地構建電磁輻射動物腦損傷模型，為闡明電磁輻射腦損傷效應的分子機理及其防治藥物研發增加了可能性。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域。更具體地說，本發明涉及一種電磁輻射動物腦損傷模型及其構建方法。

背景技術

腦是電磁輻射損傷的重要敏感靶器官。流行病學調查顯示，長期低劑量電磁輻射引起受輻射人員腦電圖異常、腦功能紊亂，重者可出現行為異常、神經衰弱、失眠多夢、記憶力減退等。另有報道指出，電磁輻射可能增加老年癡呆的發病風險。動物實驗研究表明，電磁輻射導致動物空間參考記憶、短時記憶、長時記憶及運動性學習記憶能力下降，且伴有焦慮、興奮等行為異常。以上提示，電磁輻射可引起學習記憶和情緒行為異常。進一步研究發現，電磁輻射可引起海馬腦區組織病理學改變。研究證實，海馬是參與學習記憶功能的關鍵腦區，它不僅是長時程陳述性記憶形成的決定性結構，還參與短時記憶和空間記憶的形成，同時也參與情感行為的調節。這進一步提示，電磁輻射可導致海馬腦區認知功能障礙。但是，目前還沒有較好地構建及評價電磁輻射動物腦損傷模型的方法，為研發防治藥物造成了障礙。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種電磁輻射動物腦損傷模型及其構建方法，能夠較好地構建電磁輻射動物腦損傷模型，為闡明電磁輻射腦損傷效應的分子機理及其防治藥物研發增加了可能性。

為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，根據本發明的一個方面，本發明提供了電磁輻射動物腦損傷模型構建方法，包括：設定電磁輻射條件，對試驗動物進行電磁輻射處理；比較電磁輻射處理前后試驗動物的海馬CA2區神經元鈣活動，若鈣活動變化量具有統計學意義，則利用所述電磁輻射條件構建電磁輻射動物腦損傷模型。

進一步地，在對試驗動物進行探究行為測試和情緒行為測試時，檢測試驗動物的海馬CA2區神經元鈣活動。

進一步地，預先向試驗動物海馬CA2區注射含基因編碼鈣離子指示劑GCaMP的腺相關病毒，然后利用光纖記錄系統檢測試驗動物的海馬CA2區神經元鈣活動。

進一步地，在向試驗動物腦內注射含基因編碼鈣離子指示劑GCaMP的腺相關病毒后，取試驗動物腦組織冰凍切片，采用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察GCaMP綠色熒光蛋白表達，根據綠色熒光蛋白表達情況判斷注射位置是否準確。

進一步地，利用曠場箱和新物體對試驗動物進行探究行為測試，記錄試驗動物探索新物體的次數和時間，比較電磁輻射處理前后試驗動物探索新物體的次數和時間，若次數變化量和時間變化量具有統計學意義，則利用所述電磁輻射條件構建電磁輻射動物腦損傷模型。

進一步地，利用高架十字迷宮對試驗動物進行情緒行為測試，記錄試驗動物的開放臂活動路程和開放臂活動時間，比較電磁輻射處理前后試驗動物的開放臂活動路程和開放臂活動時間，若開放臂活動路程變化量和開放臂活動時間變化量具有統計學意義，則利用所述電磁輻射條件構建電磁輻射動物腦損傷模型。

進一步地，還包括：比較電磁輻射處理前后試驗動物的海馬組織形態結構，若形態結構改變，則利用所述電磁輻射條件構建電磁輻射動物腦損傷模型。

進一步地，取試驗動物腦組織切片，用光學顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察海馬組織形態結構。

進一步地，所述電磁輻射條件至少包括中心頻率參數、功率密度參數、重復頻率、脈沖寬度、SAR值、輻射時間。

根據本發明的另一方面，本發明還提供了電磁輻射動物腦損傷模型，由所述的電磁輻射動物腦損傷模型構建方法構建得到。

本發明至少包括以下有益效果：