[發明專利]一種能夠快速有效從含粉塵的細胞懸液中分離細胞的方法

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• 申請號: 202110251664.5
• 申請日: 2021-03-08
• 公開（公告）號: CN113355273A
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 王文洋;袁亮;穆敏;陶欣榮;胡東;張榮波
• 申請（專利權）人: 安徽理工大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/078;C12N5/0786;C12N5/0787
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1.一種能夠快速有效從含粉塵的細胞懸液中分離細胞的方法，其特征在于：該分離方法主要包括使用兩種分離液從含粉塵的細胞懸液中分離細胞，用于進行后續的實驗；首先，使用兩種不同密度的細胞分離液，包括密度在1.077±0.001g/mL的淋巴細胞分離液(Ficoll)和1.30g/mL細胞分離液(Percoll)；其次這種方法可以分離多種經粉塵染毒的細胞懸液，包括小鼠肺組織、脾臟組織、肺泡灌洗液等單個核細胞懸液，也可以分離各種經粉塵染毒的細胞株；再次，這種方法經過驗證，可以分離的粉塵類型包括直徑小于0.05μm的煤塵、二氧化硅、以及不同濃度配比的二氧化硅和煤顆粒的混懸液，粉塵工作液濃度可以從50μg/mL-2000μg/mL；通過此方法分離的細胞損失少、回收細胞活力好，便于進行下次進一步的細胞實驗。

2.根據權利要求1所述的一種能夠快速有效從含粉塵的細胞懸液中分離細胞的方法，其特征在于：使用淋巴細胞分離液(Ficoll)可以從含粉塵的細胞懸液中分離單個核細胞，用于后期淋巴細胞、巨噬細胞等相關實驗。

3.根據權利要求1所述的一種能夠快速有效從含粉塵的細胞懸液中分離細胞的方法，其特征在于：使用不同濃度的細胞分離液(Percoll)可以從含粉塵的細胞懸液中分離多個核細胞及各種細胞株，例如中性粒細胞及各種類型的白細胞，還可以分離相應的細胞株，例如肺癌細胞株A549，小鼠巨噬細胞RAW264.7等。

4.根據權利要求1所述的一種能夠快速有效從含粉塵的細胞懸液中分離細胞的方法，其特征在于：這種方法可以分離的粉塵類型包括直徑小于5μm的煤塵、二氧化硅、以及不同濃度配比的二氧化硅和煤顆粒的混懸液，粉塵工作液濃度可以從50μg/mL-2000μg/mL。

5.根據權利要求1所述的一種能夠快速有效從含粉塵的細胞懸液中分離細胞的方法，其特征在于：此分離方法細胞回收率較高、對細胞損傷較小、細胞活性好，適用于后續的實驗操作。