[發明專利]RNA聚合酶突變體及其應用、重組載體及其制備方法和應用、重組工程菌及其應用有效
| 申請號： | 202110247557.5 | 申請日： | 2021-03-06 |
| 公開（公告）號： | CN112980811B | 公開（公告）日： | 2022-02-25 |
| 發明（設計）人： | 馬富強;白雪;楊晟;郭天杰;王志耘;楊廣宇 | 申請（專利權）人： | 蘇州瀚源新酶生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/12 | 分類號： | C12N9/12;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/34;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳市科進知識產權代理事務所(普通合伙) 44316 | 代理人： | 曹衛良 |
| 地址： | 215010 江蘇省蘇州*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | rna 聚合 突變體 及其 應用 重組 載體 制備 方法 工程 | ||
1.一種RNA聚合酶突變體，其特征在于，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生V586P突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生M833F突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生Q506A突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變和V586P突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變和M833F突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變和Q506A突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變和C531S突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變、V586P突變和M833F突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變、V586P突變和Q506A突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變、V586P突變和C531S突變得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突變體為：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列發生L447F突變、V586P突變、C531S突變和M833F突變得到的多肽。
2.根據權利要求1所述的RNA聚合酶突變體，其特征在于，所述RNA聚合酶突變體的編碼序列為：由如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列組成的多核苷酸序列進行替代得到的多核苷酸，所述RNA聚合酶突變體的突變位點對應相應的核苷酸序列。
3.根據權利要求1~2任一項所述的RNA聚合酶突變體，其特征在于，所述RNA聚合酶突變體為可溶性酶或者固定化酶。
4.一種重組載體，其特征在于，含有權利要求1~2任一項所述的RNA聚合酶突變體的編碼序列。
5.權利要求4所述的重組載體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：采用突變擴增引物對對第一載體進行PCR擴增，得到重組載體，其中，所述突變擴增引物對含有所述RNA聚合酶突變體的突變位點對應的核苷酸序列，所述第一載體含有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列對應的編碼序列。
6.一種重組工程菌，其特征在于，含有權利要求4所述的重組載體。
7.權利要求1~2任一項所述的RNA聚合酶突變體、權利要求4所述的重組載體或者權利要求6所述的重組工程菌在合成RNA中的應用。
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