[發明專利]艾滋病病毒N肽融合抑制劑FPPR-N36及其應用

在審

• 申請號: 202110245272.8
• 申請日: 2021-03-05
• 公開（公告）號: CN112851767A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 莊敏;凌虹;原晨
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫科大學
• 主分類號: C07K14/16
• 分類號: C07K14/16;C12N15/49;A61K38/16;A61P31/18
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 馬鑫

本發明公開了一種艾滋病病毒N肽融合抑制劑FPPR?N36及其應用，所述的N肽融合抑制劑的氨基酸序列為SEQIDNO:1所示。本發明的N肽融合抑制劑選取HIV?1gp41N端融合肽近端(FPPR)的10個氨基酸(HXB2,Env，536?545)與N36(HXB2,Env，546?581)相連，確保可以形成完整的α螺旋結構。此外，本發明還檢測了該N肽融合抑制劑對不同亞型HIV?1假病毒和細胞膜融合的的抑制效果、與CHR形成的6股螺旋束(6HB)的α螺旋比例及穩定性以及與CHR的相互作用的能力。結果表明，相較于已知的N36抑制劑，本發明的N肽融合抑制劑更穩定，且具有廣譜性，對HIV?1的抑制能力也更強，且可抑制N36和IZN36篩選出的抵抗突變株。因此，本發明的提出為抗艾滋病病毒藥物的研制提供了更多的、更具有抑制潛力的選擇。

技術領域

本發明涉及一種艾滋病病毒N肽融合抑制劑，還涉及該抑制劑在抑制HIV- 1中的應用，屬于多肽抑制劑(藥物)領域。

背景技術

艾滋病病毒(human immunodeficiency virus，HIV)是一種有包膜的球形病毒顆粒，包膜蛋白由表面糖蛋白gp120和跨膜糖蛋白gp41構成。gp41含有胞外區、跨膜區和胞質區，其中胞外區是促使膜融合的關鍵。胞外區含有5個功能區：融合肽(FP)、融合肽近端(FPPR)、N末端重復區域(NHR)、C末端七重復區域(CHR)和近膜區(MPER)。FP含有多個疏水氨基酸，可以插入細胞膜，促使6股螺旋束(6HB)的形成，FP16(gp160_512-527)是最具代表性的FP核心序列，含有疏水性的氨基酸且結構靈活，具有促進插入細胞膜的作用。FPPR(gp160_528-541)呈螺旋結構，可以與MPER相互作用，同時還可以增加gp41的Tm值，從而增加三聚體的穩定性。NHR和CHR含有多個七疏水重復序列，按順序分為a，b，c，d，e，f，g位。其中NHR可自發形成ɑ螺旋，組成三聚體卷曲螺旋(coiled-coil core)。HIV侵入靶細胞的過程分為三個步驟:(1) gp120通過CD4結合位點(CD4bs)與CD4結合，導致可變區V1和V2的變化，暴露輔助受體CCR5和CXCR4的結合位點，V3區與輔助受體結合后改變gp120構象，進而使gp41構象發生改變，疏水性FP暴露，插入并固定在宿主細胞膜表面；(2)3個CHR通過反向平行的方式與自發形成三聚體卷曲螺旋的NHR結合，形成6HB；(3)病毒膜與宿主細胞膜逐漸拉近，形成融合孔(fusionpore)，病毒基因組通過融合孔進入細胞內，完成融合過程。病毒的融合過程為抗病毒藥物的研發提供了精準的靶點，融合肽抑制劑是衍生于gp41 NHR或CHR序列的人工合成肽，作用于自然狀態的病毒或融合中間體，與gp41的相應部分結合形成異源性6HB，抑制CHR與NHR形成病毒自身6HB，從而抑制膜融合和病毒進入靶細胞。N肽抑制劑的抑制機制分為兩個方面，一方面以單體或二聚體形式與gp41的NHR相互作用，形成異源三聚體，從而干擾病毒6HB的形成。另一方面是自發形成三聚體卷曲螺旋，靶向暴露的gp41 CHR，形成異源性6HB，從而阻止病毒自身6HB的形成，三聚體形式的抑制劑溶解度好，抑制潛力也明顯增加。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有艾滋病病毒N肽抑制劑體外篩選后抵抗突變株出現，提供了一種可以抑制N36和IZN36的抵抗突變株的艾滋病病毒N肽融合抑制劑。

本發明所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現的：

本發明的一種艾滋病病毒N肽融合抑制劑，命名為FPPR-N36，所述的N 肽融合抑制劑的氨基酸序列為SEQ ID NO:1所示。