[發明專利]一種用于膀胱組織修復的生物材料及其制備方法

在審

• 申請號: 202110234629.2
• 申請日: 2021-03-03
• 公開（公告）號: CN113304319A
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: 賈瑞鵬;周六化;顧忠澤;陳早早;徐世慧
• 申請（專利權）人: 南京市第一醫院
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/22;A61L27/20;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/56
• 代理公司: 北京中知法苑知識產權代理有限公司 11226
• 代理人: 李明;趙吉陽

本發明提出一種用于膀胱組織修復的生物材料的制備方法，包括以下步驟：選擇明膠，并對進行改性處理，以獲得甲基丙烯酸酰化水凝膠；選擇透明質酸，并進行改性處理，以獲得甲基丙烯酸酰化透明質酸；選擇和制備膀胱無細胞基質，并進行改性處理，以獲得甲基丙烯酸酰化膀胱無細胞基質；按比例混合上述三種材料并促使發生原位交聯反應，以獲得所述生物材料。本發明所獲得的生物材料，其成分大部分來源于膀胱自身，保留有膀胱的生物活性因子，具備較高的生物活性以及良好的生物相容性，能夠促進膀胱尿路上皮細胞、膀胱平滑肌細胞、Cajal間質細胞及人臍靜脈內皮細胞的再生；與傳統的生物材料相比，其力學性能更優異。

技術領域

本發明涉及生物醫用材料的制備及組織工程技術領域，具體涉及一種用于膀胱組織修 復的復合生物材料及其制備方法。

背景技術

底膜是一種重要的細胞外基質，存在于所有的上皮和內皮組織中，能夠維持組織的完 整性，并作為不同細胞和分子之間的屏障，將不同的組織類型進行分隔，且具有機械信號 的傳導等功能。基底膜的主要成分為層粘連蛋白、IV型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白多糖以及 多種生長因子、細胞因子、趨化因子和蛋白酶。目前應用廣泛的BME/matrigel，是一種由 上皮性腫瘤分離而來的基底膜提取物，成分類似于真正的基底膜。但BME/matrigel存在一 定的缺點：1)由于BME/matrigel是從腫瘤細胞中提取出來的，而動物和組織制備物中的腫瘤大小存在差異，因此會存在批次間的差異；2)直接成膠時還存在強度不夠，孔隙大小、硬度和拉伸性無法調整等問題。

膀胱無細胞基質(BAM)是將膀胱進行脫細胞處理后得到的支架材料，具有良好的生物相 容性。動物實驗證明，利用BAM進行膀胱替代后，觀察到尿路上皮細胞再生良好，BAM替代 區的尿路上皮細胞和膀胱本身的尿路上皮幾乎一樣(中國專利200810020808.0)。但現有技 術制備的BAM仍然存在一些問題：1)平滑肌細胞再生欠佳，在BAM替代的中心區，平滑肌 細胞較稀少，排列雜亂不規則；2)在BAM的制備過程中，由于脫細胞試劑(曲拉通X-100， 脫氧膽酸納以及十二烷基硫酸鈉等)的使用不當，導致細胞外基質中生物活性因子受到較 大影響；3)現有的BAM制備技術對其超微結構的影響還不明確，膀胱脫細胞基質的孔徑及 孔隙率無法人為控制。

發明內容

本發明提供了一種具有適合的多孔結構、良好的力學性能(強度、硬度和延展性)、生 物活性和生物相容性、能夠促進膀胱組織修復的生物材料，兼具工藝簡單、成本低、無污染等優點。本發明的另一個目的是提供該生物材料的的制備方法。

本發明的具體技術方案如下：

一種用于膀胱組織修復的生物材料的制備方法，包括以下步驟：

選擇明膠，并對所述明膠進行改性處理，以獲得甲基丙烯酸酰化水凝膠；

選擇透明質酸，并對所述透明質酸進行改性處理，以獲得甲基丙烯酸酰化透明質酸；

選擇和制備膀胱無細胞基質，并對所述膀胱無細胞基質進行改性處理，以獲得甲基丙 烯酸酰化膀胱無細胞基質；

按比例混合所述甲基丙烯酸酰化水凝膠、所述甲基丙烯酸酰化透明質酸、所述甲基丙 烯酸酰化膀胱無細胞基質形成混合溶液；

促使所述混合溶液發生原位交聯反應，以獲得所述生物材料。

可選地，所述形成混合溶液包括：

將所述甲基丙烯酸酰化水凝膠和所述甲基丙烯酸酰化透明質酸按照比例混合于第一緩 沖溶液中；

將所述甲基丙烯酸酰化膀胱無細胞基質置于第二緩沖溶液中；

將混合后的第一緩沖溶液加入含有所述甲基丙烯酸酰化膀胱無細胞基質的第二緩沖溶 液中。