[發明專利]提升靈芝菌三萜化合物的光生物反應器及藻菌共生體系的構建方法

在審

• 申請號: 202110229131.7
• 申請日: 2021-03-02
• 公開（公告）號: CN113005017A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 吉喜燕;侯梅芳;吳世超;袁曉磊;宋麗莉
• 申請（專利權）人: 上海應用技術大學
• 主分類號: C12M1/12
• 分類號: C12M1/12;C12M1/00;C12N1/14;C12N1/12;C12P39/00;C12P33/00;C12R1/89;C12R1/645
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 胡晶

本發明公開了一種提升靈芝菌三萜化合物的光生物反應器及藻菌共生體系的構建方法，所述光生物反應器內設置隔擋膜，隔擋膜將光生物反應器分為第一培養箱和第二培養箱，第一培養箱用于培養蛋白核小球藻，第二培養箱用于培養靈芝菌，隔擋膜用于防止蛋白核小球藻細胞體和靈芝菌細胞體產生黏連和膠黏。采用光生物反應器構建藻菌共生體系的方法包括S1：將蛋白核小球藻細胞接種于第一培養箱內的PDB培養基；S2：將靈芝菌細胞接種于第二培養箱內的PDB培養基；S3：將蛋白核小球藻細菌和靈芝菌細胞接種后的光生物反應器置于恒溫恒光的無菌室，溫度設置為28?30℃，光照強度設置為130μmol/m²/s?150μmol/m²/s，培養10?15天。本發明的藻菌共生體系對靈芝菌的三萜化合物的提升具有顯著的效果。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術制造領域，尤其涉及一種提升靈芝菌三萜化合物的光生物反應器及用光生物反應器提升三萜化合物含量的藻菌共生體系構建方法。

背景技術

抗腫瘤藥物的研發一直是生物醫藥技術的研究熱點，天然抗癌物質具有毒副作用小的巨大優勢。三萜類化合物是一種典型的活性抗癌物質，而靈芝菌(Ganoderma lucidum)能夠產生大量的三萜化合物，因此如何提升靈芝菌的三萜化合物含量成為備受關注的熱點。目前，靈芝菌產生三萜類化合物產量的提升依然是這種活性抗癌物質提取的技術瓶頸之一。

發明內容

本發明提供一種提升靈芝菌三萜化合物的光生物反應器及藻菌共生體系的構建方法，本發明的藻菌共生體系對靈芝菌培養體系中三萜類化合物的提升具有顯著的效果。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：

一種提升靈芝菌三萜化合物含量的光生物反應器，所述光生物反應器內設置隔擋膜，所述隔擋膜將所述光生物反應器分為第一培養箱和第二培養箱，第一培養箱用于培養蛋白核小球藻，第二培養箱用于培養靈芝菌，所述隔擋膜用于防止蛋白核小球藻細胞體和靈芝菌細胞體產生黏連和膠黏，但是細胞體之外的活性物質可以正常透過隔擋膜。

優選地，所述隔擋膜為孔徑為0.22μm的水相聚醚砜膜。

優選地，所述光生物反應器長25cm、寬15cm、高15cm。

一種提升靈芝菌三萜化合物含量的藻菌共生體系構建方法，體系構建采用權利要求1-3任意一項所述的提升靈芝菌三萜化合物含量的光生物反應器，包括以下步驟：

S1：將5-10mL濃度為1×10⁵cell/mL-5×10⁵cell/mL的蛋白核小球藻接種于第一培養箱內的PDB培養基；

S2：將5-10mL濃度為1×10⁵CFU/mL-5×10⁵CFU/mL的靈芝菌接種于第二培養箱內的PDB培養基；

S3：將蛋白核小球藻細菌和靈芝菌接種后的光生物反應器置于恒溫恒光的無菌室，溫度設置為28-30℃，光照強度設置為130μmol/m²/s-150μmol/m²/s，培養10-15天；

其中步驟S1和S2不分先后順序。

優選地，所述步驟S1中濃度為1×10⁵cell/mL-5×10⁵cell/mL的靈芝菌的具體培養為將處于對數期的蛋白核小球藻接種于PDB培養基中，進行無菌培養，培養3-5代，直至蛋白核小球藻細胞濃度達到1×10⁵cell/mL-5×10⁵cell/mL時用于藻菌共生體系的構建。