[發明專利]與溶酶體貯積癥的測試相關的化合物和方法

在審

• 申請號: 202110228427.7
• 申請日: 2014-03-17
• 公開（公告）號: CN113004351A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: A·謝爾克斯基;J·庫爾諾耶;M·蓋爾布
• 申請（專利權）人: 珀金埃爾默健康科學股份有限公司;華盛頓大學
• 主分類號: C07H15/10
• 分類號: C07H15/10;C07C233/18;C12Q1/34
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 顏芳

本發明涉及與溶酶體貯積癥的測試相關的化合物和方法。本發明提供包括適合于檢測酶，如溶酶體儲存酶的活性的化合物的底物，其中所述底物包括：糖部分；允許糖部分與所述底物的其余結構共軛的連接子部分；和兩個或更多個脂肪酸鏈或其衍生物，其中的至少一個經充分結構化以提供水性或有機溶劑系統中提高的可溶性。還提供使用本發明底物的使用底物檢測酶活性的方法。

本申請是分案申請，原申請的申請日為2014年3月17日，申請號為201480027876.3，發明名稱為“與溶酶體貯積癥的測試相關的化合物和方法”。

相關申請的交叉引用

本申請取決于2013年3月15如提交的美國臨時申請第61/789,985號且要求所述申請的優先權，所述申請的內容以全文引用的方式并入本文中。

技術領域

本說明書涉及檢測酶活性以檢測溶酶體酶活性的分析型試劑。

背景技術

溶酶體貯積癥為一組遺傳性病癥，其特征為身體中缺乏特定酶，導致身體不能分解代謝物質。舉例來說，法布立病(Fabry disease)為每40,000人中見于一人的溶酶體貯積癥。其由酶α-半乳糖苷酶的缺乏造成，所述缺乏導致身體不能分解稱作神經酰胺三己糖苷(globotriaosylceramide)的特定脂肪物質。第二實例為戈謝病(Gaucher disease)，由不能分解稱作葡糖神經酰胺(也被稱為葡糖腦苷脂)的脂肪物質或脂質造成的溶酶體貯積癥。患有戈謝病的個體不制造葡糖腦苷脂酶，分解這些脂肪物質所需的酶。這些脂肪物質隨后積聚在肝、脾和骨髓細胞中。第三實例為蓬佩病(Pompe disease)，由缺乏分解某些稱作肝糖的糖所需的酶酸性α-葡糖苷酶造成的溶酶體貯積癥。當酶酸性α-葡糖苷酶缺失時，肝糖積聚在身體中的各種組織和器官中。

溶酶體貯積癥主要為兒童病癥，盡管一些顯現在成人期。在大部分所述病癥中，患者在出生時正常且在一些時間以后開始具有進展性神經惡化。臨床表現型取決于生化缺陷的類型和嚴重程度。這些溶酶體病癥中的一些，如蓬佩病和克拉培病主要顯現于嬰兒期。已持續努力開發在臨床癥狀發作之前檢測此類病癥以使得可以起始治療性干預的方法。

在過去的十年里，測試代謝病癥的實驗室已將串聯質譜引入到其新生兒篩選程序中。串聯質譜持續在診所中受到歡迎，因為此技術允許在單一樣品中檢定多種代謝物。舉例來說，此技術已實施為使用干燥血點樣品檢測新生兒中的遺傳代謝病癥的常規臨床實踐。盡管溶酶體酶活性可以使用串聯質譜定量，但由于可溶性問題和并入外標的需要，公布的檢定方法已略微難以適應臨床配置。

因此，仍需要用于檢測溶酶體病癥的改進的方法和組合物。

發明內容

提供以下發明概述以促進對本發明特有的創新性特征中的一些的理解且不打算為完整描述。本發明的各種方面的完整理解可以通過將整個說明書、權利要求書、附圖和摘要作為整體來獲得。

提供使用如質譜的檢測系統檢測酶促反應的改進的組合物和方法。這些組合物提供在水性溶劑系統中的提高的可溶性和/或與目標酶的提高的反應性，進而提高檢定效率、再現性和精確性。

本發明提供適用于評估樣品中的溶酶體酶活性水平的化合物。測試溶酶體酶活性例如在新生兒中篩選代謝病癥時以及在評估具有影響酶活性的醫學病況的個體或經歷如替代療法、基因療法或骨髓移植的醫學治療的個體時適用。本文所述的化合物包括用于目標酶的底物和適用作酶檢定中的對照物或標準物的相關分子。

本發明的一個目標為提供適合于檢測酶，說明性地由于缺乏而導致溶酶體貯積癥的酶的活性的底物。提供具有以下通式的底物：