[發明專利]一種變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽及其應用

有效

• 申請號: 202110226901.2
• 申請日: 2021-03-01
• 公開（公告）號: CN112961216B
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發明（設計）人: 涂歡芯;邱莉莉;張學佳;潘乙懷;任佩琪
• 申請（專利權）人: 溫州醫科大學附屬口腔醫院
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/20;C07K1/16;C07K1/14;C12Q1/04
• 代理公司: 溫州市品創專利商標代理事務所(普通合伙) 33247
• 代理人: 洪中清

本發明公開了一種變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽及其應用，屬于生物工程技術領域，變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽的氨基酸序列為TFFRLFNRGGGRRWWRF，變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽是將CSP片段與短鏈的人工抗菌肽結合形成。本發明采用異性靶向抗菌肽窄譜、高效的抗菌特性提示，將能特異性結合于變異鏈球菌表面的靶向肽片段與廣譜抗菌肽片段相連所得到的變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽具有齲病防治的應用潛能，使用窄譜抗菌藥物選擇性降低牙菌斑中主要致齲菌(如變異鏈球菌)的含量，使非致齲菌轉化為優勢菌，能夠有效抑制致齲菌的再定植，最終達到齲病長期預防的目的。

技術領域

本發明涉及生物工程領域，更具體地說，涉及一種變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽及其應用。

背景技術

齲病是人類最常見的口腔疾病，在全球范圍內流行性廣。至2010年，全球患有乳牙齲但未行治療的兒童人數為6.21億人，而未行治療的恒牙齲患者多達24億人，占全球人數的35％。在中國，齲病的防治工作同樣十分嚴峻。據我國第三次和第四次口腔健康流行病學調查報告顯示，我國兒童齲患情況呈現上升態勢，5歲兒童乳牙齲患率為70.9％，比十年前上升了5.8個百分點；12歲兒童恒牙齲患率為34.5％，比十年前上升了7.8個百分點。而齲病的治療需要大量的醫療支出，2010年全球在維持口腔健康方面的直接醫療支出總額達2976.7億美元，其中用于治療齲病以及齲病所導致的牙齒缺失共耗費530億美元。因此，齲病的早期防治對提高生活質量和節約醫療資源均具有重要的意義。

人類口腔內的細菌種類超700種，大部分時間細菌與宿主保持和諧共處的關系，通過相互作用共同維持口腔環境的健康。而當這種和諧的關系被干擾時，則會導致機會致病菌產生疾病。齲病是一類慢性的感染性疾病，口腔微生物菌黏附、定植于牙面并代謝碳水化合物產酸，導致局部硬組織脫礦大于再礦化是齲病發生的最直接的原因。變異鏈球菌是公認的主要致齲菌，原因在于：①齲洞中常能分離出變異鏈球菌；②變異鏈球菌在動物模型中通過高糖飲食能成功誘導齲病形成；③變異鏈球菌具有高度產酸、耐酸性；④變異鏈球菌能產生Ⅰ/Ⅱ型表面抗原和非水溶性葡聚糖，從而提高對牙面和其他細菌的黏附。但在正常釉質表面的“健康”牙菌斑內變異鏈球菌的含量很低，優勢菌以非變異鏈球菌(如血鏈球菌、格氏鏈球菌等)和放線菌為主，且能抵抗外界致齲菌的定植；而當個體的口腔衛生差且長期高糖飲食時，牙菌斑內的致齲菌逐漸轉變為優勢菌，變異鏈球菌的含量顯著增高。

廣譜抗菌藥物能降低唾液、牙菌斑中的細菌含量，理論上能夠有效預防齲病的發生發展。目前已有體外研究顯示多種植物提取物及其衍生物，以及天然或人工合成的廣譜抗菌肽對包括變異鏈球菌在內的口腔致齲菌和非致齲菌均起到一定的廣譜殺菌作用。但目前暫無臨床試驗證實廣譜抗菌藥物減少齲病發生的有效性，且廣譜抗菌藥物在齲病防治應用時存在眾多弊端：廣譜抗菌藥物在非特異性殺滅細菌后，仍然為致齲菌和非致齲菌的重新定植提供了“平等競爭”的機會，因此理論上它并不能長期預防變異鏈球菌等致齲菌的再感染；長期使用可引起口腔和腸道內菌群失衡，并產生細菌耐藥、嘔吐、腹瀉、牙齒著色等副作用等。

發明內容

1.要解決的技術問題

針對現有變異鏈球菌靶向抗菌肽的抗菌肽片段多采用天然的抗菌肽或其衍生物。天然抗菌肽存在肽鏈長、抗菌活性不強、細胞毒性大等缺陷，而人工設計合成的新型抗菌肽由于能人為決定其特性，在防齲應用方面具有更大的潛能。如通過化學組合庫法設計合成的KSL、RW和螺旋輪法得到的WLBU2、GH12等均能有效抑制變異鏈球菌或其他常見致齲菌。本發明的目的在于提供將CSP片段與短鏈的人工抗菌肽結合形成的變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽的肽鏈更短，合成難度降低、成本減小，具有更大的應用潛能。

2.技術方案

為解決上述問題，本發明采用如下的技術方案：

一種變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽，本發明中將其記為M8RW，其特征在于變異鏈球菌特異性靶向抗菌肽的氨基酸序列為TFFRLFNRGGGRRWWRF。