[發(fā)明專利]一種疏水介質(zhì)及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110225564.5 | 申請日: | 2021-03-01 |
| 公開(公告)號: | CN112980037B | 公開(公告)日: | 2022-09-20 |
| 發(fā)明(設計)人: | 王少云;楊金華;龔小鵬;楊亮 | 申請(專利權(quán))人: | 蘇州星譜生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C08J7/12 | 分類號: | C08J7/12;C08J7/02;B01J13/02;C08L5/12 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 215123 江蘇省蘇州市中國(江蘇)自由貿(mào)易試驗*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 疏水 介質(zhì) 及其 制備 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種疏水介質(zhì)的制備方法,包括如下步驟:S1:將瓊脂糖微球或者親水化聚合物微球于有機溶劑與去離子水混合溶液中進行溶脹處理;S2:向所述混合溶液中加入相轉(zhuǎn)移催化劑及固體堿;S3:向所述S2中滴加丁基縮水甘油醚或辛基縮水甘油醚,在一定溫度條件下,疏水配基與微球發(fā)生偶聯(lián)反應得到所述疏水介質(zhì)。本發(fā)明還公開了由所述方法制備的疏水介質(zhì)。本發(fā)明的疏水介質(zhì),具有穩(wěn)定性好、活性高的優(yōu)點。
技術(shù)領域
本發(fā)明涉及離子交換介質(zhì)技術(shù)領域,具體涉及一種疏水介質(zhì)及其制備方法。
背景技術(shù)
疏水色譜 (Hydrophobic interaction chromatography,HIC):是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同,用流動相洗脫時,各組分遷移速度不同而達到分離的目的。流動相一般為pH 6-8的鹽水溶液,具有對蛋白質(zhì)的回收率高,蛋白質(zhì)變性可能性小等優(yōu)勢。由于流動相中不使用有機溶劑,也有利于蛋白質(zhì)保持固有的活性。
近十年來,隨著細胞技術(shù)和生物工程的發(fā)展,存在著大量的蛋白質(zhì)、抗體等生物分子的純化、分析工作,介質(zhì)需求越來越高。然而目前現(xiàn)有的疏水介質(zhì)存在工藝復雜,使用有機溶劑,不易產(chǎn)業(yè)化。迫切需要工藝簡單、綠色環(huán)保的分離純化填料。CN103145899B-一種高效疏水介質(zhì)的制備方法及其在純化蛇毒降纖酶中的應用中采用的是聚合物微球為基質(zhì),雖然其機械強度比較高,但親水性很差,從而造成生物相容性很差,不利于用于分離純化中。文獻發(fā)現(xiàn),“Hydrophobic interaction chromatography : The synthesis and the useof some alkyl and aryl derivatives of agarose”中采用的2步偶聯(lián)加上需要除水工藝制備的苯基疏水介質(zhì)。文獻“直接偶聯(lián)法制備配基密度可控的瓊脂糖層析介質(zhì)” 雖然是采用一步偶聯(lián)制備丁基疏水介質(zhì),但該反應需要在無水的條件下,在進行該反應前需要用大量的有機溶劑進行脫水處理。目前現(xiàn)有文獻方法制備了疏水介質(zhì),需要多步法,而且需要大量有機溶劑除水,反應條件苛刻,不利于規(guī)模化工業(yè)生產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有技術(shù)的上述問題,本發(fā)明的目的之一是提供一種疏水介質(zhì),該疏水介質(zhì)穩(wěn)定性好、活性高該本發(fā)明的疏水介質(zhì),具有本發(fā)明的另一個目的在于提供一種制備所述疏水介質(zhì)的方法,該方法反應條件溫和、操作簡單、工藝可控。
為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供了一種疏水介質(zhì),所述介質(zhì)以瓊脂糖微球或者親水化聚合物微球為基質(zhì),在所述微球的表面通過功能化修飾得到;
其中,所述功能化修飾采用的活化劑為丁基縮水甘油醚或辛基縮水甘油醚。
作為優(yōu)選,所述瓊脂糖微球的粒徑為90μm,其耐壓達到0.3MPa。
作為優(yōu)選,所述親水化聚合物微球的粒徑為50μm,其耐壓達到10MPa。
本發(fā)明中,瓊脂糖微球或者親水化聚合物微球優(yōu)選采用商品化瓊脂糖微球Sepharose 6 Fast Flow、Sepharose 4Fast Flow或POROS? 50 OH。
本發(fā)明另一方面提供了上述疏水介質(zhì)的一種制備方法,包括以下步驟:
S1:將瓊脂糖微球或者親水化聚合物微球于有機溶劑及去離子水混合溶液里面進行溶脹處理;
S2: 把相轉(zhuǎn)移催化劑及固體堿加入S1中,并升高溫度;
S3: 向所述S1中加入配基縮水甘油醚,以對所述微球進行功能化偶聯(lián),得到所述疏水介質(zhì)。
作為優(yōu)選,步驟S1中,溶脹處理(溶脹處理的目的:使溶劑盡可能進入孔道內(nèi)部,增大反應速率。)的條件為:溶脹過程中進行攪拌,攪拌速度為60-100rpm,攪拌時間為0.5-1h;
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