[發(fā)明專利]一種檢測米酵菌酸的試紙條及方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110223190.3 | 申請日: | 2021-03-01 |
| 公開(公告)號: | CN113156125B | 公開(公告)日: | 2023-07-11 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 萬宇平;吳小勝;張瑜;趙正苗;王兆芹;劉玉梅;賈芳芳;杜玲 | 申請(專利權(quán))人: | 北京勤邦科技股份有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/577 | 分類號: | G01N33/577;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/53 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 檢測 米酵菌酸 試紙 方法 | ||
1.一種檢測米酵菌酸的試紙條,包括樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜、吸水墊和底板,所述反應(yīng)膜上具有包被有米酵菌酸半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質(zhì)控線,所述結(jié)合物釋放墊上噴涂有米酵菌酸單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物;所述米酵菌酸單克隆抗體是以米酵菌酸半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物作為免疫原制備獲得;所述米酵菌酸半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物由米酵菌酸半抗原與載體蛋白偶聯(lián)得到,所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍(lán)蛋白、甲狀腺蛋白或人血清白蛋白;其特征在于所述米酵菌酸半抗原的合成方法為:取4mg米酵菌酸加5mL甲苯溶解后,加入0.34mL三乙胺中和至中性,加入2mg氧化銅,攪拌,冷卻到0℃,然后加入1.3mg?4,5-二甲基-[1,3]二氧戊環(huán)-2-硫酮充分?jǐn)嚢瑁偌尤?.27mL四氯化鈦,0℃下繼續(xù)攪拌1h,加0.3mL?1mol/L鹽酸淬滅反應(yīng),加水20mL,乙酸乙酯60mL萃取三次,合并有機(jī)相,加5g無水硫酸鈉干燥,有機(jī)相蒸干,得到巰基-米酵菌酸3.2mg,即為米酵菌酸半抗原,其分子結(jié)構(gòu)式為:
2.如權(quán)利要求1所述的試紙條,其特征在于所述樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜、吸水墊依次粘貼在底板上。
3.如權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的試紙條,其特征在于所述結(jié)合物釋放墊1/3~1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。
4.一種制備權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述試紙條的方法,其包括步驟:
1)制備噴涂有米酵菌酸單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物的結(jié)合物釋放墊;
2)制備具有包被有米酵菌酸半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質(zhì)控線的反應(yīng)膜;
3)將1)和2)制備好的結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。
5.一種檢測食品中米酵菌酸的方法,其包括步驟:
1)樣品前處理;
2)用權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的試紙條進(jìn)行檢測;
3)分析檢測結(jié)果。
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