[發明專利]構建原位原發肺癌動物模型的方法

有效

• 申請號: 202110223079.4
• 申請日: 2021-02-26
• 公開（公告）號: CN112852714B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 陳崇;納飛飛;劉玉
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N15/12;A01K67/027
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

本發明公開了一種原位原發的肺癌腫瘤模型制備方法，屬于腫瘤動物模型領域。本發明通過將小鼠肺細胞以特定培養基培養成類器官，再將類器官進行基因編輯，注射回小鼠肺，使其發展成腫瘤。本發明的方法相比基因工程腫瘤動物模型耗時短，成瘤率高；相比移植瘤動物模型，具有腫瘤發生和發展的體內微環境，更接近肺癌最真實的狀態。

技術領域

本發明屬于腫瘤動物模型領域。

背景技術

肺癌是嚴重影響人類健康的惡性腫瘤，主要分為非小細胞肺癌(NSCLC,Non-smallcell?lung?cancer)和小細胞肺癌(SCLC,Small?cell?lung?cancer)，肺癌發病率及死亡率均居所有癌癥的首位。

肺癌細胞模型是研究肺癌機制和藥物治療肺癌活性的基礎模型，但肺癌細胞模型通常經歷了很多代次培養，遺傳信息發生偏移，丟失或者增加了某些特定染色體片段。正常組織或者腫瘤都有強烈的異質性，種類單一的細胞系與體內狀態差異極大，而且對于某些藥物的抗性，基因的影響都不能反應病人的真實情況。

相比之下，動物模型更能接近肺癌的真實情況，但是，現有的肺癌動物模型存在各種各樣的問題。

皮下移植模型，需要在免疫缺陷鼠皮下移植大量的腫瘤細胞系，細胞系本身就很難表征病人腫瘤特征，皮下腫瘤更是不能反應肺組織生態。人源異種移植瘤模型(PDX，patient?derived?Xenograft?model)除了移植在皮下的弊端以外，由于病人本身的差異，標本取材的差異，導致該模型的成功率很大程度上取決于標本本身，而且重度免疫缺陷鼠的飼養成本太高，難度很大。原位移植模型由于小鼠肺纖細，手術難度非常大，監測腫瘤形成需要特殊設備，但是該模型可以模擬肺腫瘤的生態環境。基因鼠模型的背景非常明晰，成瘤的位置也完全有可能在肺原位，但是成瘤概率較低，容易造模前死亡，成本非常高，基因鼠制備繁殖周期太長。致癌物質誘導模型是最古老的一種肺癌模型，很大程度上取決于小鼠的基因背景，該模型其實很難模擬病人的腫瘤形成情況。

發明內容

本發明的目的在于提供一種更接近肺癌生物學特性、且制備周期短的原位原發肺癌模型。

為了實現上述發明目的，本發明提供了以下技術方案：

一種肺類器官培養方法，包括如下步驟：

將肺細胞Matrigel混合，待Matrigel凝固后，加入類器官培養基進行培養，即可：

所述培養基是DMEM/F12，加上如下添加劑得到：