[發明專利]具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽

有效

• 申請號: 202110215490.7
• 申請日: 2021-02-10
• 公開（公告）號: CN113248564B
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: 于志鵬;紀慧卓;劉璇;趙文竹
• 申請（專利權）人: 渤海大學
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K5/093;C07K14/78;A61K38/39;A61P17/00;A61K8/65;A61Q19/02;A23L33/18
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本發明公開了具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽，其氨基酸序列分別為Ser?Asp?Trp(SDW)，Gly?Ala?Arg(GAR)，和Asp?Gly?Leu(DGL)。本發明所提供的具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽能持續穩定抑制酪氨酸酶的活性，抑制黑色素的合成，且具有活性高、安全、無毒、易于消化吸收等優點，可作為美白功能成分用于化妝品和有助于改善黃褐斑功能的保健品，具有廣泛的應用前景和十分重要的意義。

技術領域

本發明屬于生物活性肽領域，具體涉及具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽。

背景技術

酪氨酸酶(EC1.14.18.1)，又稱多酚氧化酶，是一種廣泛存在于生物體內的催化黑色素合成的關鍵限速酶。在黑色素生成過程中，酪氨酸酶催化L-酪氨酸氧化成L-多巴，隨后將L-多巴氧化生成L-多巴醌，再通過一系列非酶促反應轉化為黑色素。在人體中，酪氨酸酶過量表達，可能導致色素沉著性疾病如老年斑、雀斑、黃褐斑和黑色素瘤等。其中，黃褐斑是最常見的色素沉著性疾病，多發生于女性面部，嚴重影響容貌。目前，尚無治療黃褐斑的有效手段，給患者造成情緒問題和心理壓力，降低生活質量。同時，在哺乳動物大腦中發現酪氨酸酶活性與帕金森病和其它神經退行性疾病相關。

研究發現通過抑制酪氨酸酶活性可實現減少皮膚黑色素的生成，酪氨酸酶抑制劑在化妝品、保健品和藥品領域有廣泛應用前景。目前，常見的酪氨酸酶抑制劑，主要包括曲酸、抗壞血酸和熊果苷等。含有上述酪氨酸酶抑制劑的美白化妝品對皮膚有美白作用的同時也會對皮膚造成一定程度傷害，同時這些抑制劑容易使產品不穩定。如曲酸被廣泛用于治療黑色素性皮膚病，但其穩定性差且長期使用可導致皮膚癌。抗壞血酸是一種被廣泛應用的皮膚增白劑，但會快速發生氧化還原反應而失效。熊果苷具有高度光敏感性、不穩定，添加在美白化妝品中易變色。中國發明專利公開了一種具有協同抑制酪氨酸酶作用的組合物及應用(公開號CN 111920790 A，申請日期2020.09.15)，所述具有協同抑制酪氨酸酶作用的組合物以苯乙基間苯二酚為有效成分，超劑量使用苯乙基間苯二酚將對皮膚造成影響。因此，尋找天然、無毒且穩定高效的新型酪氨酸酶抑制劑具有重要的意義。活性肽天然、安全、高效、易于人體吸收，具有良好的皮膚美白功效。

本發明旨在提供具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽，并應用于制備有助于改善黃褐斑功能的保健品及美白化妝品。

發明內容

本發明公開了具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽，其氨基酸序列分別為Ser-Asp-Trp，Gly-Ala-Arg，和Asp-Gly-Leu。

本發明的具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽，可用于制備有助于改善黃褐斑功能的保健品及美白化妝品。

本發明的具有酪氨酸酶抑制作用的活性肽，與酪氨酸酶的對接能量值分別為-84.32，-81.67，-112.12kcal mol^-1，對酪氨酸酶活性的半抑制濃度(IC₅₀)分別為0.84mg/mL，0.34mg/mL，和0.15mg/mL。

本發明的目的通過以下技術方案實現：

(1)活性肽的篩選

本發明借助在線酶切工具ExPASy PeptideCutter(http：//web.expasy.org/peptide_cutter/)對膠原蛋白序列進行虛擬酶切，共釋放111條肽序列。通過在線程序PeptideRanker、peptide property calculator和Discovery Studio(DS)的ADMET模塊對所得肽序列的生物活性、水溶性和毒性進行預測，篩選得到25條具有良好生物活性、水溶性且無毒性的生物活性肽。從Protein Data Bank(PDB)數據庫獲取酪氨酸酶的3D結構(PDBID：2Y9X)并將其作為受體蛋白，通過DS軟件進行分子對接篩選能與酪氨酸酶活性位點緊密結合的肽。以‘-CDOCKER_Energy’值為篩選指標，得到三條最具潛在酪氨酸酶抑制活性的肽SDW，GAR，和DGL。