[發明專利]一種薄層色譜的構建方法和同時鑒定金銀花和甘草成分的方法及其應用

有效

• 申請號: 202110210023.5
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN113759016B
• 公開（公告）日: 2023-09-29
• 發明（設計）人: 張志強;韓妮娜;林爽;王杰;李夢榮;欒仲欣;高珊珊;付靜
• 申請（專利權）人: 北京康仁堂藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/92
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 周衛賽

本發明屬于中藥檢測技術領域，具體涉及一種薄層色譜的構建方法和同時鑒定金銀花和甘草成分的方法及其應用，該薄層色譜的構建方法采用四妙勇安湯供試品制備供試品溶液，對供試品溶液進行薄層色譜檢測，該方法能夠同時將供試品溶液中的甘草成分和金銀花成分很好的展開，分離度高，斑點多且清晰不聚集，色譜信息全面，且不受陰性干擾，因此，制得的薄層色譜可用于同時鑒別甘草成分和金銀花成分，使得鑒別過程快速方便、鑒別結果準確可靠。

技術領域

本發明屬于中藥檢測技術領域，具體涉及一種薄層色譜的構建方法和同時鑒定金銀花和甘草成分的方法及其應用。

背景技術

隨著人民群眾健康保健意識的增強，對中成藥產品的質量和安全性等有了更高的要求。四妙勇安湯由金銀花、玄參、當歸、甘草四味藥物組成。用于脫疽(即血栓閉塞性脈管炎)，證見患處黯紅，微熱微腫，痛甚，煩熱口渴，或則潰爛，膿水淋漓，舌紅脈數等。功效清熱解毒，活血止痛。

薄層色譜是將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上，晾干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色，得到的色譜圖。薄層色譜法(TLC)，系根據樣品的比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比，用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法，具有操作簡單、快速、成本低廉的優點，在中藥產品成分鑒定和質量檢測中均有廣泛使用。

目前四妙勇安湯中有效成分如何鑒別還未見標準頒布，現有的四妙勇安湯的鑒別方法一般采用綠原酸的含量為指標，然而采用單一成分不能全面反映中藥制劑內在的化學成分和種類，進而反映中藥質量。例如蔣建勤等公開了一種四妙勇安湯中綠原酸的含量測定，采用乙酸丁酯-甲酸-水(4:3:3)上層液為展開劑進行薄層色譜鑒別，僅能對金銀花進行鑒別，無法同時鑒別甘草或者其他藥材成分，方法也較繁瑣。

因此，亟需建立一種能夠快速、準確且同時鑒定四妙勇安湯復方制劑及物質基準實物中金銀花和甘草成分的方法，以保證其質量的均一、穩定、可靠。

發明內容

因此，本發明的目的在于解決現有技術中四妙勇安湯或者其復方制劑無法快速、準確且同時鑒定金銀花和甘草成分的問題。

為此，本發明提供了一種薄層色譜的構建方法，包括如下步驟：

四妙勇安湯供試品溶液的制備：取四妙勇安湯供試品、水與正丁醇混合，固液分離，取液體，得到供試品溶液；

對供試品溶液進行薄層色譜檢測，即得供試品的薄層色譜。

在某些優選的實施方式中，薄層色譜檢測采用乙酸丁酯-甲酸-水的上層液為展開劑，尤其是采用體積比為5-10：2.5：2.5-7.5的乙酸丁酯-甲酸-水的上層液為展開劑。

上層液是指乙酸丁酯、甲酸和水混合，然后置于分液漏斗中混合，靜置分層后得上清液即得。

進一步的，薄層色譜檢測中，在薄層板上點樣供試品溶液，采用的薄層板為硅膠G薄層板；

優選的，薄層板的長度≥10cm，更優選為10-20cm；

優選的，點樣體積為3-30μl；更優選為3-10μl。

進一步的，薄層色譜檢測中，采用香草醛硫酸溶液或者硫酸乙醇溶液為顯色劑。

優選的，采用質量百分數為2％～5％的香草醛的硫酸溶液或體積百分數為10％硫酸的乙醇溶液。

在某些優選的實施方式中，供試品溶液的制備方法包括，取四妙勇安湯供試品、水與正丁醇混合，固液分離，取液體，得到供試品溶液。

進一步的，所述四妙勇安湯供試品的質量與水、正丁醇的體積之比為0.5-1.5：5-15：5。