[發明專利]Vx702用于制備血小板體外保存劑的應用及相關血小板

在審

• 申請號: 202110208043.9
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN113016780A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 尹文;顧順利;胡興斌;徐金梅;劉二熊;陳要臻;安寧
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍空軍軍醫大學
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02;C12N5/078
• 代理公司: 西安恒泰知識產權代理事務所 61216
• 代理人: 史玫

本發明公開了Vx702用于制備血小板體外保存劑的應用及相關血小板。發明人進行的一系列研究發現Vx702可緩解血小板在體外保存過程中的凋亡，延長輸注后的體內存活期，同時可保護其止血功能。

技術領域

本發明涉及設計血小板的體外保存技術，具體涉及Vx702用于制備血小板體外保存劑的應用及相關血小板。

背景技術

在現代治療中血小板輸注必不可少，但臨床短缺已成常態。造成血小板短缺的一個重要的原因在于體外保存期過短，只有5天(說是5天，但除去采集和傳染病篩查的兩天時間外，真正可供臨床使用的時間也只有3 天)。該過短的保存期很容易導致血小板過期報廢(PNAS 2017年報道指出常規儲存血小板的過期報廢率高達10.3％)，不僅如此，采集血小板需要專門的設備和配套的耗材，國內費用約1500元人民幣，遠遠高于全血采集袋的25元人民幣。因此，較高的過期報廢率不僅制約了血小板的大量采集，進而從根本上造成短缺，而且還會因報廢而加劇短缺。

發明內容

相關技術人員公知，血小板在體外保存期間中會發生凋亡，具體表現在磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine，PS)的外翻，而外翻的PS可進一步介導內皮吞噬系統對其吞噬，最終被機體清除，進而降低其輸注后存活期。

發明人進行的一系列研究發現Vx702降低人血小板體外保存過程中 PS的外翻，說明Vx702具有抑制血小板在體外保存過程中凋亡的作用；細胞吞噬模型顯示，經Vx702處理后，巨噬細胞對人血小板的吞噬率降低，提示Vx702可延長保存血小板輸注后的體內存活期。

而且小鼠輸血模型發現，體外保存一定時間后進行輸注，小鼠體內 Vx702預處理血小板的百分比顯著高于對照組，進一步證實Vx702可延長保存血小板輸注后的體內存活期；人血栓彈力圖(thromboela-stogram，TEG)分析顯示，體外保存第7天的Vx702預處理血小板組的最大振幅值 (Maximum amplitude,MA)顯著高于對照組，且均在正常值范圍內，說明Vx702可保護體外保存血小板的止血功能。

不僅如此，小鼠出血模型發現，輸注Vx702預處理血小板組小鼠的出血時間顯著低于對照組，愈加說明Vx702可保護體外保存血小板的止血功能。

綜上所述，Vx702可緩解血小板在體外保存過程中的凋亡，延長輸注后的體內存活期，同時可保護其止血功能。

基于上述發現，本發明一方面提供了Vx702用于制備血小板體外保存劑的應用。

同時提供了一種血小板體外保存劑。所提供的血小板體外保存劑包括 Vx702。

進一步所提供的血小板體外保存劑還包括溶媒，所述溶媒選自DMSO 或水。

本發明另一方面提供了一種血小板。所提供的血小板中含有Vx702。進一步，還含有溶媒，所述溶媒選自DMSO或水。

進一步，所述Vx702在溶媒中的濃度為0.1-1μM。優選，0.45- 0.55μM。

附圖說明

圖1為PS陽性細胞百分比統計，n＝5，直方圖中的所有數據采用 mean±SEM；NS：無統計學差異；*p0.05；**p0.01；***p0.001。

圖2為巨噬細胞吞噬血小板檢測，A圖為巨噬細胞與Vx702處理血小板共孵育后CD41和CD11b雙陽性細胞百分比分析流式代表圖；B圖為巨噬細胞細胞與Vx702處理血小板共孵育后CD41和CD11b雙陽性細胞百分比統計，n＝5，直方圖中的所有數據采用mean±SEM；***p0.001。

圖3為CFSE和CD41雙陽性細胞百分比統計；n＝5，*p0.05； **p0.01；***p0.001。