[發明專利]肌酸激酶同工酶測定試劑盒

有效

• 申請號: 202110206861.5
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN113030470B
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發明（設計）人: 曾曜龍;易劍峰;施清蓉;蔡其浩;胡小雄
• 申請（專利權）人: 江西英大生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/573
• 分類號: G01N33/573
• 代理公司: 北京中和立達知識產權代理有限公司 11756
• 代理人: 楊磊

本發明公開了肌酸激酶同工酶(CKMB)測定試劑盒，包括第一試劑和第二試劑，其中第一試劑為含有聚乙二醇和肝素的磷酸鹽緩沖液；所述第二試劑為含有肌酸激酶同工酶膠乳抗體和透明質酸的甘氨酸緩沖溶液。本發明肌酸激酶同工酶測定試劑盒可通過定量客觀反映CKMB的存在，為臨床診斷及療效觀察和預后判斷提供了更有力的實驗診斷依據。本發明所提供的肌酸激酶同工酶測定試劑盒特異性高，重復性好，檢測靈敏度高，線性范圍寬，穩定性高。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，具體涉及肌酸激酶同工酶測定試劑盒，特別是涉及一種膠乳免疫比濁法肌酸激酶同工酶測定試劑盒及其應用。

背景技術

肌酸激酶(CreatineKinase,CK)廣泛存在于各種組織中，與三磷酸腺苷(ATP)的再生有關。肌酸激酶是由M和B兩種亞單位組成的二聚體，在細胞質內共有三種同工酶：即CK-MM、CK-MB和CK-BB。在細胞線粒體內還有另一種同工酶，稱為CK-Mt。這幾種同工酶雖然相對分子質量相同，但是免疫特性不同。肌酸激酶的同工酶在臨床診斷中有十分重要的意義，在各種病變包括肌肉萎縮和心肌梗塞發生時，人的血清中肌酸激酶水平迅速提高，目前認為在心肌梗塞的診斷中測定肌酸激酶的活性比做心電圖更為可靠。心肌梗死時，肌酸激酶在起病6小時內升高，24小時達高峰，3-4日內恢復正常。其中肌酸激酶的同工酶CK-MB診斷的特異性最高，臨床上主要用于心肌梗死、病毒性心肌炎的輔助診斷。

肌酸激酶同工酶測定的方法有電泳法、離子交換柱層析法、免疫抑制法、金標記法、免疫酶標法和放射免疫法等。常規應用電泳法和免疫抑制法較多，但電泳法無法應用于全自動生化分析儀，所用儀器價格昂貴，所以無法普及。其他常用檢測還有免疫比濁法和酶聯免疫吸附法等。由于酶聯免疫吸附法檢測耗時且操作復雜，已經不能滿足大型醫院快速定量檢測的要求，而免疫比濁法隨著全自動生化儀的普及，已經發展出來多種快速免疫比濁檢測技術。

乳膠增強免疫透射比濁法的基本原理是，首先將抗體吸附在一種膠乳顆粒上，當遇到相應的抗原時，抗原抗體結合而出現乳膠凝集。單個乳膠顆粒的大小在入射波長之內，光線可透過，當兩個以上的乳膠顆粒凝集時，可阻礙光線透過，使得透射光減少，其減少程度與抗原的量成正比。此法提高了檢測的靈敏度和準確度，得到了廣泛的應用。然而，乳膠增強免疫比濁法反應后會產生沉淀，不利于生化儀的清洗，干擾試驗結果，且乳膠制造成本較高，導致免疫比濁試劑盒價格和檢測成本偏高。因此又出現了納米顆粒增強的免疫比濁法，如專利CN101680890便公開了一種通過比濁法測量人抑半骯氨酸蛋白酶蛋白C的比濁免疫測定方法和試劑組合，以及中國專利CN101819208中公開了一種利用微球免疫比濁法檢測腦鈉肽試劑盒。專利CN101680890中具體公開了，表面修飾了抗體的由聚苯乙烯、聚氯乙烯、環氧樹脂、聚偏1,1-二氯乙烯、聚-α-萘基甲基丙稀酸酯、聚乙烯萘以及它們相應的共聚物制成的粒徑在80-105nm的有機高分子膠體納米顆粒。

中國專利申請CN 109613242 A公開了一種肌酸激酶同工酶檢測試劑盒及其制備方法，包括：磁分離試劑和酶標記抗體；磁分離試劑包括：表面上結合有第一抗CK-MB單克隆抗體和第二抗CK-MB單克隆抗體的磁微粒；酶標記抗體包括：酶標記的第三抗CK-MB單克隆抗體；和/或，酶標記的第四抗CK-MB單克隆抗體；其中，第一、第二、第三和第四抗CK-MB單克隆抗體分別特異于肌酸激酶同工酶的不同表位。

中國專利申請CN 108548926 A公開了一種肌酸激酶同工酶檢測試劑盒。該試劑盒包括第一試劑、第二試劑。第一試劑包含緩沖液、防腐劑、增凝劑、表面活性劑、保護劑、阻斷劑；第二試劑包含緩沖液、穩定劑、防腐劑、保護劑、聚苯乙烯膠乳顆粒、肌酸激酶同工酶抗體。

發明內容

基于上述背景技術，現有技術尚未關注試劑盒在存儲過程中的穩定性問題。本發明所要解決的技術問題在于一種肌酸激酶同工酶測定試劑盒，其目標在于提高試劑盒的長期穩定性。為了實現本發明的發明目的，擬采用如下技術方案：

本發明一方面涉及肌酸激酶同工酶測定試劑盒，包括第一試劑和第二試劑，其特征在于：