[發明專利]一種分子組裝類熒光探針及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202110206170.5
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN113150770B
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 卿光焱;陳緣愿;朱志超
• 申請（專利權）人: 武漢紡織大學
• 主分類號: C09K11/06
• 分類號: C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 武漢世躍專利代理事務所(普通合伙) 42273
• 代理人: 鄔麗明

1.分子組裝類熒光探針在識別三甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸中的應用，所述分子組裝類熒光探針其結構式分別如下：

CB[n](n＝6,7,8)

所述分子組裝類熒光探針是通過H33258與CB[n]非共價鍵相互作用組裝所得，所述的CB[n]為CB[6]、CB[7]或CB[8]這三種葫蘆脲中的任意一種。

2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的分子組裝類熒光探針的制備方法包括以下步驟：將H33258用水溶解，加入CB[n]，使H33258與CB[n]的摩爾比為1:1-2，攪拌1-4h后，旋轉蒸發濃縮溶液，然后冷凍干燥得到所述分子組裝類熒光探針。

3.如權利要求1所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

1)先配置濃度為3.0-10μM的熒光探針水溶液三份，在激發波長361nm條件下測其發射的熒光光譜，記錄每一份熒光探針水溶液在400-650nm處的最大發射熒光強度I_0A，I_0B，I_0C；

2)往三份溶液中分別加入Fmoc保護的賴氨酸、二甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸和三甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸并混合均勻，每種類型的賴氨酸與所述熒光探針的摩爾比為0.3-0.5，在激發波長361nm條件下分別測三份溶液發射的熒光光譜，記錄其在400-650nm處的熒光強度I_1A，I_1B，I_1C；

3)重復步驟2)n遍，使每次滴加的每種類型的賴氨酸的量與步驟2)相同，分別得到Fmoc保護的賴氨酸的熒光強度為I_2A至I_nA；二甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸的熒光強度為I_2B至I_nB；三甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸的熒光強度為I_2C至I_nC；

4)分別以熒光強度I_0X,…I_nX對應的賴氨酸類型的摩爾數與熒光探針的摩爾數之比為橫坐標，以I_0X,…I_nX為縱坐標，做非線性擬合，即得到不同類型賴氨酸的熒光響應性曲線，其中X為A、B或C；若I_nX/I_0X≤0.55時，則說明溶液中包含有三甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述步驟1)中的分子組裝熒光探針水溶液中加入Tris-HCl緩沖液調節pH＝2～7。

5.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述Fmoc保護的賴氨酸為Lys、二甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸為Lys2，三甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸為Lys3，其結構式分別如下：

6.分子組裝類熒光探針在識別包括有三甲基取代的Fmoc保護的賴氨酸的肽中的應用，所述分子組裝類熒光探針其結構式分別如下：

CB[n](n＝6,7,8)

所述分子組裝類熒光探針是通過H33258與CB[n]非共價鍵相互作用組裝所得，所述的CB[n]為CB[6]、CB[7]或CB[8]這三種葫蘆脲中的任意一種。